病毒学报

2021, v.37(03) 648-657

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携带高滴度猪瘟病毒C株猪睾丸细胞株的建立及蛋白质组学分析
Establishment and Proteomics Analysis of Porcine Testis Cell Line Carrying Strain C of Swine Fever Virus with High-Titer

张智慧;魏衍全;谷玲军;张韵;孙世琪;尹双辉;郭慧琛;

摘要(Abstract):

猪睾丸细胞(Swine testicular,ST)广泛用于猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的传代,为了进一步提高ST细胞增殖的CSFV滴度,我们利用有限稀释法克隆出一种稳定携带高滴度CSFV C株的单克隆细胞株(STC)。间接免疫荧光实验结果显示,几乎100%STC细胞携带CSFV抗原;且STC细胞中CSFV滴度为106TCID50/mL,与CSFV单次感染亲本ST细胞的病毒滴度104TCID50/mL相比,具有更高的病毒产量。为了探究STC细胞持续带毒后细胞内蛋白表达水平的变化,我们通过非标记定量蛋白质组学分析发现541种蛋白表达水平发生明显变化,并选取其中差异显著且与病毒复制或细胞存活相关的两种上调蛋白(GRP94,GRP78)、两种下调蛋白(β-catenin,ISG15)进行免疫印迹验证。本试验成功获得了可以稳定携带高滴度CSFV C株的STC细胞株,并初步筛选了与细胞持续带毒有关的目标蛋白,不仅为简化猪瘟传代细胞苗生产工艺提供条件,也为研究STC细胞持续携带CSFV稳定传代的机制奠定基础。

关键词(KeyWords): 猪瘟病毒C株;稳定细胞株;高滴度带毒;蛋白表达差异

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点研发计划项目(项目号:2017YFD0500906),题目:牛羊疫苗新型佐剂及工艺研究;; 国家自然科学基金项目(项目号:31672592),题目:仿生矿化优化口蹄疫病毒样颗粒耐热抗逆性研究~~

作者(Author): 张智慧;魏衍全;谷玲军;张韵;孙世琪;尹双辉;郭慧琛;

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DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003921

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