一株牛源阿卡斑病毒的分离鉴定Isolation and Identification of Akabane Virus from Cattle in China
朱沛;肖雷;朱建波;解明富;高林;李华春;
摘要(Abstract):
阿卡斑病毒(Akabane virus,AKV)是能引起牛、绵羊、山羊流产、早产、新生胎儿畸形的虫媒性RNA病毒。为了解家畜虫媒病毒在我国西南边境地区的分布和流行情况,本研究对中缅边境西盟县的52份牛抗凝血和140份血清(牛70份、羊70份)中的蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)、鹿流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)、AKV等虫媒病毒进行检测与分离,通过ELISA及qRT-PCR方法检测病毒,通过核酸阳性抗凝血接种BHK细胞传代以分离病毒,通过设计特异性引物,扩增分离毒株S基因721bp片段及M基因816bp片段,通过克隆测序及中和试验以鉴定病毒,最终从38号牛的抗凝血中分离到一株AKV,TCID_(50)为10~(-3.5)/0.1mL,经比对,分离株S片段与日本KS-2/Mo/06毒株亲缘关系最近,核苷酸同源性为97.66%,M片段与中国DHL10M110毒株亲缘关系最近,核苷酸同源性为96.56%。本研究首次报告了从云南边境地区牛群中分离到AKV,证实了西南边境存在AKV的流行,为AKV在我国的流行病学和边境地区疫病风险防控提供了重要参考及有力依据。
关键词(KeyWords): 阿卡斑病毒(AKV);病毒分离;病毒鉴定;序列分析
基金项目(Foundation): 云南省应用基础研究计划青年项目资助项目(项目号:2017FD056),题目:蓝舌病病毒NS3蛋白对I-IFN产生的影响研究~~
作者(Author): 朱沛;肖雷;朱建波;解明富;高林;李华春;
Email:
DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003876
参考文献(References):
- [1]Stram Y,Brenner J,Brennerman Y,Banet-Noach C,Kuznetzova L,Ginni M.Akabane virus in Israel:a new virus lineage[J].Virus Res,2004,104(1):93-97.
- [2]Akashi H,Nakamura K,Murakami T.Restriction fragment length polymorphism analysis of Akabane virus nucleoprotein gene[J].J Vet Med Sci,1997,59(9):837-840.
- [3]Bryant J E,Crabtree M B,Nam V S,Yen N T,Duc HM,Miller B R.Isolation of arboviruses from mosquitoes collected in northern Vietnam[J].Am J Trop Med Hyg,2005,73(2):470-473.
- [4]王玉瑾,吴雯娟,张婷,吴绍精,陈勇,仲建忠,詹爱军.赤羽病ELISA检测方法的建立及试剂盒的研制[J].养殖与饲料,2013,11:15-19.
- [5]Ogawa Y,Fukutomi T,Sugiura K,Sugiura K,Kato K,Tohya Y,Akashi H.Comparison of Akabane virus isolated from sentinel cattle in Japan[J].Vet Microbiol,2007,124(1-2):16-24.
- [6]Brenner J.Akabane viral encephalitis in calves[J].Vet Rec,2007,161(18):636.
- [7]Oguzoglu T C,Toplu N,Koc B T,Dogan F.First molecular detection and characterization of Akabane virus in small ruminants in Turkey[J].Arch Virol,2015,160(10):2623-2627.
- [8]Elhassan A M,Mansour M E,Shamon A A.Aserological survey of Akabane virus infection in cattle in Sudan[J/OL].ISRN Vet Sci,2014,2014:123904.DOI:10.1155/2014/123904.
- [9]朱其太.台湾从犊牛分离到阿卡斑病毒[J].畜牧兽医科技信息,1997,22:11.
- [10]李其平,周立桥,姚龙涛.阿卡斑(赤羽病)病毒的分离与初步鉴定[J].中国动物检疫,2000,17(7):27-29.
- [11]冯云,章域震,杨卫红,张海林.阿卡斑病毒云南分离株全基因组序列特征研究[J].病毒学报,2016,32(2):161-169.DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002902.
- [12]Tang H B,Chen F,Rao G.Characterization of Akabane virus fromdomestic bamboo rat,Southern China[J].Vet Microbiol,2017,207:280-285.
- [13]刘焕章,李树清,吴东来,李健,陈建康,王巧全,陆晓东,胡永强.赤羽病微量病毒中和试验诊断方法的研究[J].中国预防兽医学报,2001,23(1):53-55.
- [14]李健,李树清,王巧全,胡永强,陈沁.赤羽病间接ELISA检测方法的建立和标化[J].中国预防兽医学报,2003,25(6):483-486.
- [15]Akashi H,Nakamura K,Murakami T.Restriction fragment length polymorphism analysis of Akabane virus nucleoprotein gene[J].J Vet Med Sci,1997,59(9):837-840.
- [16]全国动物防疫标准化技术委员会.GB/T 18089-2008.蓝舌病微量血清中和试验及病毒分离和鉴定方法[S].北京:中国标准出版社,2000:10.
- [17]Kurogi H,Inaba Y,Goto Y.Serologic evidence for etiologic role of Akabane virus in epizootic abortion-arthrogryposis-hydranencephaly in cattle in Japan 1972-1974[J].Arch Virol,1975,47(1):71-83.
- [18]冯云,何彪,付士红,杨卫红,章域震,涂长春,梁国栋,张海林.云南蚊虫中阿卡斑病毒的分离和鉴定[J].病毒学报,2015,31(1):51-57.DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002626.
- [19]花群义,杨云庆,董俊,杨晶焰,贾建军,周晓黎,徐自忠.赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达[J].中国兽医科技,2003,33(10):7-14.
- [20]张义爽,武瑞,丛琳,曲艳鹏,李启涛,徐丹丹,孙美涵,孙志鹏.赤羽病研究进展[J].黑龙江畜牧兽医,2016,2:72-74.
- [21]孟锦昕,李楠,肖雷,何于雯,寇美玲,宋建领,牛保生,李华春.云南黄牛血液中阿卡斑病毒的分离鉴定及S基因序列分析[J].中国兽医学报,2019,39(9):1703-1709.