病毒学报

2021, v.37(05) 1135-1147

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小反刍兽疫病毒Nigeria75/1疫苗毒及其N蛋白对山羊PBMCs免疫效应的影响
Effects of Peste Des Petits Ruminants Virus Nigeria75/1 Vaccine Strain and N Protein on the Immune Responses of Goat Peripheral Blood Mononuclear Cells

周岩岩;吴锦艳;李玲霞;刘丹;周建华;曹小安;刘永生;刘湘涛;尚佑军;

摘要(Abstract):

小反刍兽疫(PPR)是羊、骆驼等小反刍动物的一种急性、烈性、接触性A类传染病,发病率和致死率极高。目前,PPR在全球仍呈现区域性流行和多地散发势态。为探讨PPRV及N蛋白体外诱导山羊外周血单个核细胞(PBMCs)在不同时间对PBMCs免疫应答效应的影响。本研究将PPRV Nigeria75/1疫苗毒(1 MOI)、重组N蛋白(10μg/mL)和RPMI 1640(阴性对照)体外刺激PBMCs 48h、72h、96 h。采用CCK-8法检测PBMCs细胞增殖情况;qRT-PCR及ELISA检测炎症因子包括IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平及分泌情况;流式细胞术检测T细胞CD4+和CD8+的表达、及单核来源树突状细胞(DCs)表面分子CD40、CD86、CD80的表达、以及检测PPRV感染PBMCs引起的细胞凋亡。研究发现:与对照组相比,PPRV能够抑制PBMCs的体外增殖,显著促进炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ的表达(P<0.05)。并且PPRV感染PBMCs产生细胞凋亡,促进CD4+T细胞和CD8+T细胞表达。另外PPRV体外刺激DCs,CD40、CD86、CD80的表达显著升高(P<0.05),提示PPRV具有刺激DCs细胞成熟与分化的功能。进一步研究发现PPRV N蛋白体外刺激PBMCs能引起与PPRV作用相同的免疫效应。本研究表明PPRV Nigeria75/1疫苗毒体外感染PBMCs主要引起炎症反应与细胞凋亡、促进单核来源DCs成熟与分化,并且N蛋白参与PPRV引起的各项免疫功能。

关键词(KeyWords): 小反刍兽疫病毒;N蛋白;外周血单个核细胞;免疫效应

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点研发计划项目(项目号:2018YFD0502000),题目:肉用山羊生物安全防控技术体系研究与示范;; 国家现代肉羊产业体系建设项目(项目号:CARS-38),题目:病毒病防控岗位课题;; 甘肃省草食畜牧产业体系项目(项目号:GARS08),题目:牛羊疫病综合防控技术~~

作者(Author): 周岩岩;吴锦艳;李玲霞;刘丹;周建华;曹小安;刘永生;刘湘涛;尚佑军;

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DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003961

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