病毒学报

2021, v.37(05) 1051-1059

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中国东北地区人乳头瘤病毒16型全基因组克隆及HPV16.HaCaT重组细胞模型的构建及初步鉴定
Cloning of the Complete Genome of Human Papillomavirus Type 16 from Patient in Northeast China,and Construction and Preliminary Identification of the Recombinant Cell Model HPV16.HaCaT

刘淼;吴盈盈;路一平;吴思;王爽;崔畅婉;于淼;孙峥嵘;

摘要(Abstract):

为构建含东北地区人乳头瘤病毒16型(HPV16)全基因组的HPV16.HaCaT细胞模型,收集中国东北地区HPV16单一感染患者宫颈脱落细胞,提取DNA,将HPV16全基因组分成4个区段,通过4对特异性引物对HPV16全基因组进行分段扩增,测序后进行序列拼接及核酸序列分析,克隆HPV16全基因组序列;通过细胞转染,构建含HPV16全基因组的HPV16.HaCaT重组细胞模型;利用聚合酶链式反应(PCR)和细胞免疫荧光法检测重组细胞内HPV16早期基因的表达。成功克隆出中国东北地区HPV16全基因组序列(GenBank登录号:MW320358);构建了东北地区HPV16全基因组的重组质粒及HPV16.HaCaT重组细胞模型;证明了HPV16早期基因E1^E4、E5、E6和E7在重组细胞模型内均有表达,从而获得中国东北地区HPV16全基因组序列及含有HPV16全基因组的HPV16.HaCaT重组细胞模型。

关键词(KeyWords): 人乳头瘤病毒16型全基因组(HPV16);表达载体构建;重组细胞模型;聚合酶链式反应(PCR)

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 辽宁省重点研发计划(项目号:2018225009),题目:人乳头瘤病毒16型E7蛋白通过选择性调控干扰素刺激基因群ISGs表达抵抗β干扰素抗病毒作用;; 辽宁省高等学校基本科研项目(项目号:LFWK201710),题目:分析STAT1在抗人乳头瘤病毒反应中的作用~~

作者(Author): 刘淼;吴盈盈;路一平;吴思;王爽;崔畅婉;于淼;孙峥嵘;

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DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004029

参考文献(References):

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