• 草鱼呼肠孤病毒NS31蛋白在昆虫细胞中表达及互作多肽筛选

    万偲佳;喻飞;吕利群

    草鱼呼肠孤病毒(Grasscarpreovirus,GCRV)是引发病毒性草鱼出血病的主要病原。前期研究证实GCRV-S7基因片段编码NS31蛋白是GCRV的非结构蛋白,在病毒感染的中后期表达。为深入开展NS31的具体生物学功能,本研究从GCRV-JX01株病毒基因组中扩增NS31,克隆至pFastBacHTA载体;利用杆状病毒Bac-to-Bac系统成功表达携带his标签的重组蛋白his-NS31;Western-Blot和IFA实验表明重组杆状病毒能够感染昆虫细胞(Sf9)表达NS31,进一步通过his-Ni2+柱纯化NS31,SDS-PAGE鉴定蛋白约为30KD。运用噬菌体展示技术筛选噬菌体12肽库,研究NS31特异性结合多肽。挑取30个克隆进行DNA序列测定,结果表明NS31主要和2种多肽分子相互作用。进一步结合生物信息学分析表明上述多肽与草鱼基因组中6个基因具有同源性,提示其可能是NS31互作蛋白。本研究为深入探索NS31在病毒感染过程中的生物学功能奠定了重要基础。

    网络首发时间: 2021-08-30 08:58:56[查看摘要][在线阅读][下载 794K]
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  • GⅡ.26型诺如病毒的组织血型抗原结合特征

    李涵博;丛鑫;段招军

    诺如病毒(Noroviruses,NoVs)是引起全球急性胃肠炎的常见病原。组织血型抗原(Histo-blood groups antigens,HBGAs)是NoVs黏附因子(受体),能促进病毒感染宿主细胞。NoVs主要衣壳蛋白突出(Protruding,P)区是与HBGAs结合的关键结构域。本研究构建了非流行毒株GⅡ.26型NoVs P区的原核表达重组质粒,以谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione s-transferase,GST)亲和层析纯化P蛋白,人鼻病毒的3C蛋白酶去掉GST标签,通过酶联免疫吸附实验探索P蛋白与HBGAs相互作用的特点,借助同源结构模拟以及结构重叠分析其与相应糖分子之间可能存在的对接位点。结果表明,P蛋白可与包括A型、B型、AB型、O型和非分泌型的215种唾液中的大部分发生结合,但只与19种寡糖中的H双糖结合;模拟的GⅡ.26 P单体的空间构象与GⅡ.17类似,可通过糖结合位点的5个氨基酸与H双糖特异性结合。本研究阐明了GⅡ.26 P蛋白与HBGAs的结合特征及潜在分子机制,为进一步揭示GⅡ.26 NoVs可能的流行趋势及研发潜在抗病毒药物奠定一定的基础。

    网络首发时间: 2021-08-27 15:19:33[查看摘要][在线阅读][下载 541K]
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  • 乙型肝炎病毒X蛋白上调环加氧酶2表达促进肝癌细胞增殖的实验研究

    元顺女;朴美花;金丹

    乙肝病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)高表达与乙肝相关肝癌的发病密切相关,但HBx发挥促癌作用的机制并不清楚。环加氧酶2(Cyclooxygenase,COX2)具有促进肝癌细胞增殖的功能,乙肝相关肝癌中COX2的表达增加且与HBx呈正相关,提示上调COX2可能是HBx促进肝癌细胞增殖的分子机制。为了阐明HBx是否通过上调COX2促进肝癌细胞增殖,本实验培养了肝癌HepG2细胞并分为对照组、转染pcDNA3.1-HBx质粒的HBx组、转染NC siRNA的si-NC组、转染NC siRNA及pcDNA3.1-HBx质粒的si-NC+HBx组、转染COX2 siRNA及pcDNA3.1-HBx质粒的si-COX2+HBx组。检测细胞增殖活力OD490 nm的水平,COX2、B淋巴细胞瘤2基因(BCL2)、生存素(Survivin)的表达量,前列腺素E2(英文名,PGE2)的含量。实验结果显示,HBx组的OD490 nm水平,细胞中COX2、BCL2、Survivin的表达量,培养基中PGE2的含量均高于对照组;si-COX2+HBx组的OD490 nm水平,细胞中COX2、BCL2、Survivin的表达量,培养基中PGE2的含量均低于si-NC+HBx组。以上结果表明,HBx促进肝癌细胞增殖的作用部分由上调COX2表达所介导。本实验阐明了上调COX2在HBx促进肝癌细胞增殖中的作用,这为今后研究HBx发挥促癌作用的分子机制以及乙肝相关肝癌的发病机制提供了新思路。

    网络首发时间: 2021-08-27 15:18:28[查看摘要][在线阅读][下载 505K]
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  • PGC-1α基因在HIV-1包膜糖蛋白gp120诱导神经元线粒体功能障碍中的作用及机制研究

    王星;刘江福;杨鹏雅;何秀华;李由

    人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency viru,HIV)包膜糖蛋白gp120具有神经毒性,可引起神经元损伤,与HIV相关性痴呆的发生有关,但gp120引起神经元损伤的机制尚不清楚。有研究报道gp120能够引起神经元出现线粒体功能障碍,而PGC-1α是促进神经元内线粒体生成的关键基因。因此,本研究将分析PGC-1α基因在HIV-1包膜糖蛋白gp120诱导神经元线粒体功能障碍中的作用及机制。原代培养皮层神经元细胞后分为对照组、gp120组、空白质粒组、gp120+空白质粒组,gp120+PGC-1α质粒组、PGC-1α质粒组,检测细胞活力OD490 nm、线粒体膜电位(△ψm)水平、三磷酸腺苷(ATP)含量、活性氧簇(ROS)含量、凋亡率及PGC-1α、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平。结果显示,gp120组皮层神经元的PGC-1α表达水平、OD490 nm水平、△ψm水平、ATP含量均低于对照组,ROS含量、凋亡率、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均高于对照组;过表达PGC-1α后,gp120+PGC-1α质粒组皮层神经元的PGC-1α表达水平、OD490 nm水平、△ψm水平、ATP含量均高于gp120+空白质粒组,ROS含量、凋亡率、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均低于gp120+空白质粒组。以上结果表明,gp120诱导皮层神经元出现线粒体氧化呼吸功能减退、线粒体途径凋亡等线粒体功能障碍的表现,抑制PGC-1α基因表达是gp120诱导线粒体功能障碍的相关机制之一。本研究的创新点在于探究了gp120诱导神经元线粒体功能障碍的分子机制,研究发现抑制PGC-1α基因表达是gp120诱导神经元线粒体功能障碍的相关机制之一,这为今后阐明gp120诱导神经元损伤及HIV相关性痴呆的发病机制提供了实验依据。

    网络首发时间: 2021-08-24 14:57:41[查看摘要][在线阅读][下载 593K]
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  • 人疱疹病毒6型感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达的变化及生物学意义

    王锋存;刘军莉;双杰

    人疱疹病毒6A型(Human Herpesvirus 6A,HHV6A)感染与神经胶质瘤的发病有关,但具体机制尚不清楚。HHV6A感染能够增加miR-301a的表达,而miR-301a表达在胶质瘤发病中起促进作用。为了观察HHV6A感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达的变化及生物学意义,本研究培养了神经胶质瘤细胞株U87、U251、U373,HHV6A感染后检测了miR-301a及RUNX3(Runt-Related Transcription Factor 3,RUNX3)的表达;U87细胞在感染HHV6A的同时分别转染阴性对照(Negative Control,NC)miR、miR301a抑制物、NC siRNA、RUNX3 siRNA,检测细胞增殖、迁移、侵袭;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-301a靶向RUNX3。结果显示,HHV6感染的U87、U251、U373细胞中miR-301a表达增加、RUNX3表达降低且HHV6感染的U87中miR-301a上调、RUNX3下调幅度最大。在U87细胞中,与对照组比较,HHV6组增殖、迁移、侵袭增强,RUNX3表达降低;与miR-NC+HHV6组比较,miR-301a敲低+HHV6组增殖、迁移、侵袭减弱,RUNX3表达增加;与HHV6+miR-301a敲低+si-NC组比较,HHV6+miR-301a敲低+si-RUNX3组增殖、迁移、侵袭增强,RUNX3表达降低;经双荧光素酶报告基因验证,miR-301a靶向RUNX3基因mRNA 3'UTR。以上结果表明,HHV6A感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达增加,进而通过靶向抑制RUNX3促进细胞增殖、迁移、侵袭。本研究初步探究了HHV6A感染促进神经胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的作用及分子机制,进而为深入认识神经胶质瘤恶性生物学行为的调控机制及发病机制提供了实验依据,也为今后发现神经胶质瘤新的防治靶点提供思路。

    网络首发时间: 2021-08-23 17:07:52[查看摘要][在线阅读][下载 894K]
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  • 云南省首例人感染G4基因型欧亚类禽H1N1猪流感病毒病原学特征分析

    李梓;赵晓南;黄维娟;杨磊;成艳辉;谭敏菊;李希妍;刘佳;陈志肖;隗合江;伏晓庆;王大燕

    2020年云南发现了首例人感染G4基因型欧亚类禽H1N1(EA H1N1)猪流感病毒,针对分离到的A/YunnanMengzi/1462/2020(H1N1v)病毒分析其血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)氨基酸变异位点、生物学耐药、受体亲和力及抗原性变异特征,并对2020-2021年度季节性流感疫苗对该病毒的交叉保护效果进行评价。结果显示,EA H1N1猪流感病毒A/Yunnan-Mengzi/1462/2020(H1N1v)与世界卫生组织推荐的疫苗株A/Hunan/42443/2015(H1N1v)HA和NA氨基酸位点同源性分别为97.9%和97.4%;A/Yunnan-Mengzi/1462/2020(H1N1v)病毒对神经氨酸酶抑制剂敏感,以结合人流感病毒唾液酸受体α2,6为主,与疫苗株抗原性存在8倍以上差异。接种季节性流感疫苗的儿童、成人和老年组人群针对季节性流感疫苗株A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019(H1N1pdm)抗体滴度≥40者占比分别为80.0%、76.7%和63.3%;而对A/Yunnan-Mengzi/1462/2020(H1N1v)抗体滴度仅为13.3%、26.7%和6.7%。本研究提示接种季节性流感疫苗后产生的抗体对G4基因型EA H1N1病毒不能提供有效保护,该病毒与目前EA H1N1病毒疫苗株在氨基酸位点和抗原性上存在显著差异,并且保持了结合人流感病毒唾液酸受体的特性,研究结果提示需要构建新的疫苗株。

    网络首发时间: 2021-08-18 13:17:52[查看摘要][在线阅读][下载 560K]
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  • H13亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用

    朱彤;商瑞;程凯慧;于志君;吴家强

    H13亚型禽流感病毒以往只在海鸥、鸭等水禽中被发现,2018年,我们实验室报道了蛋鸡感染H13亚型禽流感病毒的证据,表明H13亚型禽流感病毒存在从水禽中溢出感染陆禽的风险,因而有必要加强对H13亚型禽流感病毒的监测。实时荧光定量PCR由于具有特异性强、灵敏度高、检测时间短等优点,在病原监测工作中得到了广泛应用。本研究以H13亚型禽流感病毒的HA基因作为靶基因,设计了一对特异性荧光定量PCR检测引物,通过特异性试验、敏感性试验等,建立了H13亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法,并应用建立的检测方法对海鸥粪便样品进行核酸检测。实验结果发现,该检测方法的灵敏度为1.60×100拷贝/μL;该检测方法对H1、H3、H5、H6、H7和H9等6个亚型的禽流感病毒无交叉反应;该检测方法的敏感性是常规PCR的10倍;海鸥粪便样品中H13亚型禽流感病毒的核酸检测阳性率为18.8%。我们建立的H13亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强等特点,该检测方法可用于大量临床样品的快速检测,为H13亚型禽流感病毒监测工作的顺利开展提供了技术支撑。

    网络首发时间: 2021-08-18 09:34:58[查看摘要][在线阅读][下载 498K]
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  • 水痘-带状疱疹病毒ORF43蛋白的单克隆抗体制备及初步研究

    翟兵可;潘德全;付文锟;蔡雨泽;王玮;赵欢;阙玉琼;程通;夏宁邵

    水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)是引起水痘和带状疱疹这两种临床表现不同病症的共同致病原,其基因组中ORF43是VZV在宿主细胞中复制的必需基因,但目前尚无针对VZV ORF43编码蛋白性质与功能的研究报道。本研究目的是制备抗VZV ORF43单克隆抗体,以初步研究该蛋白在细胞内的表达与分布情况。本研究构建了VZV ORF43蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中进行了该蛋白的表达,纯化蛋白免疫小鼠后,使用杂交瘤技术及克隆化筛选,获得一株特异性强、反应性好的抗VZV ORF43单克隆抗体2D3。本研究使用该抗体鉴定出VZV ORF43蛋白在质粒转染细胞与病毒感染细胞中表达的分子量大小均约为70kD,但分别呈现出细胞质和细胞核的不同亚细胞定位。以上工作为后续进一步探究该蛋白在VZV感染与致病过程中的作用奠定了基础。

    网络首发时间: 2021-08-17 14:50:10[查看摘要][在线阅读][下载 525K]
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  • 牛病毒性腹泻病毒结构蛋白功能研究进展

    郗珊珊;张玲艳;贾伟娟;何云江;马德慧;王学理

    牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)基因组为单股正链RNA,编码4种结构蛋白(C、E~(rns)、E1和E2)和8种非结构蛋白(N~(pro)、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)。牛感染BVDV后可出现腹泻、流产、繁殖障碍、持续感染等症状,该病死亡率较高,对我国乃至世界养牛业均造成了严重影响。因此,本文就BVDV已确定的4种结构蛋白的功能进行了概括性总结,以期为BVDV的深入研究提供理论依据和参考。

    网络首发时间: 2021-07-24 16:14:49[查看摘要][在线阅读][下载 522K]
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  • 牛传染性鼻气管炎检测方法的最新研究进展

    何云江;张玲艳;贾伟娟;郗珊珊;王学理

    牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是一种由牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)引起的以病牛呼吸道病变为主要特征的传染性疾病,由于其严重的病理损害以及广泛的传播性,给养牛业造成巨大经济损失,因此建立快速、准确的检测方法对该病的防控尤为重要。本文主要对IBR的最新检测方法进行了简述和总结,以期为科学检测、鉴定IBR提供依据和思路。

    网络首发时间: 2021-07-24 13:25:54[查看摘要][在线阅读][下载 491K]
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  • 厦门市健康人群肠道病毒D68型血清流行病学调查

    林雨;朱瑞;吴圆圆;徐龙发;尹志超;杨宏伟;郑清炳;阙玉琼;叶江辉;何水珍;程通;夏宁邵

    肠道病毒D68型(EV-D68)是一种可引起急性呼吸道感染并诱发中枢神经系统疾病的小RNA病毒。开展相关血清流行病学调查,有助于了解病毒在人群中的感染水平,为制定有效防控策略提供科学依据。本研究为了解厦门市EV-D68的流行概况与流行病学特征,采用分层随机抽样的方式收集了2016年厦门市健康人群血清标本共515份,应用基于酶联免疫斑点检测技术的中和试验(Nt-ELISPOT)检测针对EV-D68流行株的血清中和抗体滴度。结果显示,血清样本中EV-D68中和抗体的总体阳性率为81.9%,中和抗体的总体几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)为248.0。<1岁组、1~3岁组、4~6岁组、7~19岁组、20~39岁组、40~59岁组和≥60岁组的EV-D68中和抗体阳性率分别为42.2%、49.3%、71.9%、94.2%、98.5%、100%和100%,各年龄组之间差异有统计学意义(P<0.0001);各年龄组的中和抗体GMT分别为1∶39.8、1∶80.6、1∶133.2、1∶283.7、1∶253.3、1∶308.1和1∶405.0;男、女性别之间EV-D68中和抗体的总体阳性率(P=0.6388)和总体GMT(P=0.3524)均无统计学差异;各年龄组不同性别之间的中和抗体阳性率和GMT差异均无统计学意义(P>0.05);地理位置上,市区与郊区的EV-D68中和抗体阳性率没有显著差异(P=0.0986),市中心的中和抗体GMT略低于郊区(P=0.0069)。本研究表明,厦门市健康人群中EV-D68中和抗体阳性率和GMT随年龄增长呈上升趋势,年龄是影响EV-D68感染和流行的关键因素;并且,该地各年龄人群中存在EV-D68既往感染,幼龄儿童的抗体保护水平低,需要加强对易感人群的防控措施,防止出现暴发流行。

    网络首发时间: 2021-07-23 17:16:32[查看摘要][在线阅读][下载 557K]
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  • 一起荷斯坦奶牛乳头瘤病诊断及其病毒基因型分析

    孙普;马雪青;李平花;朱新荣;扎西英派;白兴文;包慧芳;卢曾军;刘在新

    牛乳头瘤病毒是一种能够引起牛发生皮肤乳头状瘤、纤维素瘤、膀胱和食道癌的DNA病毒,现已在牛群中广泛传播,对牛养殖业造成了重大经济损失。为了诊断甘肃某荷斯坦奶牛场300多头泌乳期奶牛乳头突发疣状物的病因,本研究采用流行病学调查、临床观察、组织病理学、分子生物学检测方法和基因测序技术,对患有疣状物的奶牛进行综合诊断。结果表明,乳头患疣状物奶牛的其它部位无类似生长物,无发烧、疼痛等异常临床症状,组织病理学HE检测疣状物呈现角化过度和细胞空泡化现象,这与牛乳头瘤病毒感染的组织病理变化相似,并且用PCR方法获得了牛乳头状瘤病毒L1基因,测序比对结果显示为乳头瘤病毒7型基因,核苷酸同源性达98%以上。因此,本次荷斯坦奶牛乳头突发疣状物为乳头瘤病毒7型感染引起的,这是甘肃地区首次发现该基因型乳头瘤病毒,应引起奶牛场与防疫部门的重视。

    网络首发时间: 2021-07-02 15:04:09[查看摘要][在线阅读][下载 670K]
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  • 致手足口病肠道病毒的病原学研究进展

    黄浩;盘珍梅;潘燕兰

    手足口病是一种多病原体引起的儿童常见传染病,少数患者会进展为重症甚至死亡,对公共卫生造成巨大影响。目前国内虽已研制出EV71灭活疫苗并上市使用,对其它病毒所致手足口病并无交叉保护作用,并不能从总体上降低手足口病的发病率,在应对多种病原体的疫苗问世前,对手足口病病原体的基因进化监测、流行特征和病原学研究仍然是防控手足口病的重要措施。本文就手足口病在病原学方面的研究进展进行综述,为该病的科学防控提供有价值的信息。

    网络首发时间: 2021-06-29 10:59:58[查看摘要][在线阅读][下载 1044K]
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  • 戊型肝炎病毒感染激活补体系统

    王文静;王珏;禹文海;魏大巧;黄芬

    为了探究补体系统与戊型肝炎病毒复制的相关性,分别在HEV感染的A549细胞和BALB/c小鼠中检测C3aR、CD55和CD59蛋白的表达。利用RT-qPCR定量检测细胞和组织中补体的表达,采用免疫组化法检测HEV感染BALB/c小鼠中补体CD59及C5b-9的表达,ELISA检测补体相关炎症因子的变化。HEV感染可以激活补体蛋白C3aR、C5b-9、CD55和CD59的表达,引起补体蛋白相关炎症因子IL-10表达水平下降,IL-12和TNF-α的表达水平的上升,从而导致机体的炎症反应,加剧组织损伤。HEV感染激活补体系统并参与早期的抗病毒反应,HEV感染对补体的持续激活导致炎症因子过度表达,加重机体损伤。

    网络首发时间: 2021-06-29 10:27:43[查看摘要][在线阅读][下载 878K]
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  • 高致病性冠状病毒感染时的固有免疫应答:精准治疗的潜在靶点

    张锦涛;梁子婷;董亮

    21世纪初,包括严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)在内的高致病性冠状病毒对人类健康构成了巨大威胁。随着新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在全球的暴发,冠状病毒尤其是能够引起严重下呼吸道感染的高致病性冠状病毒(HPCoVs)再次引起了人们的关注。在HPCoVs不断出现的大背景下,阐明其致病机制并控制感染过程中的宿主免疫对抵抗病毒感染,避免过度反应至关重要。在病毒感染过程中,多种天然免疫信号在冠状病毒感染过程发挥关键作用。本文就近年来出现的HPCoVs特征及其感染过程中天然免疫的应答情况作一综述,借此探寻重症感染患者炎症反应旺盛的原因并解释其临床表现,为进一步探寻精准治疗的潜在靶点。

    网络首发时间: 2021-06-22 11:55:51[查看摘要][在线阅读][下载 546K]
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  • 冠状病毒感染与内质网应激研究进展

    田丽平;冯冠榕;鲁会军;肖朋朋;李楠;金宁一

    内质网(Endoplasmic reticulum,ER)是真核细胞细胞器的重要组成部分,主要负责蛋白质合成和翻译后修饰等过程,还参与调控了钙离子储存和脂类合成,具有重要生理功能。冠状病毒感染细胞后,在复制其遗传信息的同时也在合成大量病毒蛋白,造成未折叠/错误折叠蛋白堆积,进而增加内质网工作负担,诱发内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS),激活未折叠蛋白反应(Unfolded protein response,UPR),引起一系列信号级联反应,如诱导细胞凋亡等,进而影响病毒复制。本文就冠状病毒感染与ERS及UPR信号通路的研究进展做一综述,为新型抗冠状病毒药物的研发提供新视角。

    网络首发时间: 2021-06-15 16:38:34[查看摘要][在线阅读][下载 373K]
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  • 病毒在牙周疾病中作用的研究进展

    李天骄;张尽美;杨靖梅

    牙周炎是由菌斑微生物所引起的感染性疾病,但其发生发展还受其它如宿主免疫炎症反应、外界环境因素等的调控,各因素之间相互协同或相互拮抗。近年来随着对牙周炎的进一步认识,学者们发现病毒也参与了牙周炎的发生与发展。本文就与牙周疾病相关病毒的生物学特性以及其作用机制作一综述,旨在进一步阐明牙周炎的发病机制。

    网络首发时间: 2021-06-15 10:54:08[查看摘要][在线阅读][下载 490K]
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  • 呼吸道合胞病毒感染不同气道上皮细胞的病变特点及易感性分析

    金鑫;杨丽;张梅;余本莉;尚鲁俊;杨斌;崔玉霞;范丽;余福勋;叶芝旭

    为了比较几种不同气道上皮细胞对呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染后病变特点及易感性。采用RSV A2株感染Hep-2、A549、16HBE、BEAS-2B细胞后,显微镜观察细胞病变效应,免疫荧光检测RSV N蛋白表达及空斑实验测定细胞培养上清液中病毒滴度。结果显示RSV A2株感染Hep-2细胞后最早形成典型的合胞病变,A549细胞次之,16HBE及BEAS-2B形成病变的时间最晚。免疫荧光检测到RSV N蛋白表达特点与细胞病变特点一致。RSV A2在Hep-2上产生的病毒滴度最高,A549细胞次之,在16HBE上产生的病毒滴度最低。提示Hep-2、A549细胞对RSV具有高度易感性,以Hep-2最为敏感。而16HBE、BEAS-2B细胞对RSV感染不敏感,其中16HBE最不敏感。本研究可为选择合适的上皮细胞进行RSV相关研究奠定基础。

    网络首发时间: 2021-06-15 08:37:54[查看摘要][在线阅读][下载 858K]
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  • 环状RNA与病毒感染之间相互关系的研究进展

    许泽军;刘炜玮;王桂军;丁铲

    非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指一类不具有编码蛋白质功能的RNA,包括转运RNA(transfer RNA,tRNA)、核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)、微小RNA(micro RNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)以及环状RNA(circular RNA,circRNA)等。近年来circRNA在癌症,肿瘤以及心脑血管疾病等多种疾病中被证实发挥重要作用,此外研究还发现宿主circRNA与病毒来源的cicrRNA均会参与到病毒感染进程,但其中circRNA发挥的功能还有待进一步研究,因此,该文综述了circRNA的发现、分类、主要功能以及宿主circRNA和病毒来源的circRNA与病毒感染之间相互关系的研究进展,将有助于理解circRNA与病毒感染之间的互作机制。

    网络首发时间: 2021-05-31 14:35:23[查看摘要][在线阅读][下载 612K]
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  • 4株鸽新城疫病毒的基因组序列与致病性分析

    裴育;孙雅丽;赵烨;张国中;薛佳

    本研究对从北京、天津以及山东地区发病鸽群中分离到的4株鸽新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)进行基因组测序和遗传进化分析,并进一步比较这些毒株对鸽子的致病性。研究通过特异性引物扩增4株鸽NDV的全长基因组序列后与GenBank上已登陆的所有鸽NDV毒株的序列进行遗传进化分析;通过病毒生物学特性的测定比较分离株的毒力;通过病毒感染1月龄肉鸽,检测分离株对鸽子的致病性。结果显示4株鸽NDV毒株均属于ClassⅡ类基因Ⅵb亚型病毒,其中Pigeon/China/BJ2018株、Pigeon/China/TJ2017株和Pigeon/China/BJ2013株属于VIb/4bii f亚型,Pigeon/China/SD2012株属于VIb/4bii d亚型。4株病毒与目前国内鸽NDV流行株属于同一进化分支,与鸡源经典疫苗株La Sota属于不同进化分支。对这四个毒株进行生物学特性测定,均为中等毒力毒株。4株病毒中,Pigeon/China/BJ2018株对1月龄肉鸽的致病性最强,通过肌肉注射途径攻毒后3d肉鸽开始表现临床症状,攻毒后第5d开始出现死亡,累计死亡率高达70%;剖检可见感染肉鸽气管有出血点、脾脏出血、肾脏苍白、十二指肠出血;病理组织学观察显示,感染鸽脑组织损伤明显;组织病毒载量检测显示,病毒在脑和脾脏中大量存在,在脑组织中的病毒载量最高。本研究系统分析了4株鸽NDV国内分离株的遗传进化特点和对鸽子的致病性,从中筛选出一株致病性较强的毒株作为疫苗检验强毒,对提高鸽新城疫的防控有积极意义。

    网络首发时间: 2021-05-11 11:32:26[查看摘要][在线阅读][下载 1132K]
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  • 探讨穿心莲内酯对HIV-1感染辅助受体CXCR4启动子作用机制的研究

    冯龙;郭文涛;李志慧;郑文锦;耿宇轩

    穿心莲内酯具有明显的抗病毒作用,对HIV-1具有明显的抑制作用,本研究探讨了穿心莲内酯影响CXCR4启动子活性的作用机制。首先构建双荧光素酶报告基因载体pFireRluc-CXCR4,并转染入人HEK293T细胞;利用CCK8法检测穿心莲内酯对人HEK293T细胞细胞毒性作用;双荧光素酶报告基因技术检测穿心莲内酯对CXCR4启动子活性的影响;MTT法检测穿心莲内酯对人T淋巴细胞Jurkat细胞活性影响;实时荧光定量PCR检测穿心莲内酯对人T淋巴细胞Jurkat细胞表面CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响。PCR分别扩增了CXCR4启动子(777 bp)和Rluc(1997 bp)表达单元,通过测序和酶切鉴定双荧光素酶报告基因载体插入正确;穿心莲内酯作用于转染pFireRluc-CXCR4HEK293T细胞,双荧光素酶结果显示:穿心莲内酯能够下调CXCR4启动子活性,差异具有显著性(P<0.05)。穿心莲内酯作用于人T淋巴细胞Jurkat细胞后,qPCR和Western Blot结果显示:Jurkat细胞表面CXCR4 mRNA和蛋白表达降低。因此,穿心莲内酯能够影响CXCR4启动子活性,具有潜在的抗HIV-1的作用。

    网络首发时间: 2021-05-07 13:23:37[查看摘要][在线阅读][下载 938K]
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  • 轮状病毒感染患者外周血单个核细胞的转录组学分析

    李伯阳;赵艳玲;田玉玲;李慧莹;章青;李丹地;孙利伟;庞立丽;裴银辉;段招军

    轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起急性肠胃炎的主要病原体,分析RV感染患者的人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)有利于探讨人PBMC在清除RV中的作用。为此,本研究采集2019年2月-2019年6月长春儿童医院中RV感染患者和健康儿童血液,分离PBMC,通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)技术比较RV感染患者与健康儿童之间的RNA表达图谱,借助基因本体论(Gene Ontology,GO)数据库功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)、Reactome通路富集分析DEGs,使用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)技术进行验证。结果显示,与健康对照组相比,RV感染轻症患者PBMC中有1 619个DEGs;重症患者PBMC中有2 816个DEGs,主要与干扰素(Interferon,IFN)反应、中性粒细胞、溶酶体、核小体、染色质等相关。qPCR验证轻症患者干扰素刺激基因(IFN-stimulated genes,ISGs)15表达上调,白介素(Interleukin,IL)1β表达下调;重症患者IL15、ISG15表达上调,IL1β表达下调,与转录组结果相一致。本研究提示,RV感染可能激活人I型和II型IFNs反应抵御病毒感染,但也会抑制溶酶体相关基因,对细胞自噬过程产生影响。

    网络首发时间: 2021-04-30 10:31:23[查看摘要][在线阅读][下载 1164K]
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  • 肌动蛋白及其结合蛋白在病毒感染复制中作用的研究进展

    刘红云;刘思华;王涛;王志云

    肌动蛋白是真核细胞中最丰富的细胞骨架蛋白,广泛参与细胞运动、维持细胞形态等生物学过程。研究表明肌动蛋白及其结合蛋白在病毒吸附、进入、组装、释放中发挥重要作用,尽管具体的分子机制还不清楚,但致力于探究肌动蛋白及其结合蛋白在病毒感染中的关键调节作用,可为病毒致病机理的研究,潜在抗病毒靶点的挖掘提供理论与实践基础。本文重点介绍肌动蛋白及其结合蛋白在病毒感染各环节中的关键作用。

    网络首发时间: 2021-04-23 09:31:34[查看摘要][在线阅读][下载 425K]
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  • 1株人乳头瘤病毒6型山东地方株的全基因组序列分析

    张翠;纪峰;林小娟;寇增强;徐爱强;陶泽新;宋艳艳

    人乳头瘤病毒6型(Human papillomavirus type 6,HPV6)是引起生殖器疣与复发性喉乳头瘤的主要病原体之一。为明确2019年济南市1例尖锐湿疣患者的病毒基因组序列特征,本研究提取其尖锐湿疣组织标本总DNA,分两段进行HPV6全基因组PCR扩增和步移法Sanger测序,将拼接后的序列与全球36条不同来源的HPV6全基因组序列进行对比分析。结果显示,1013/19/JN/CHN/HPV6株(以下简称1013/HPV6)基因组全长8031bp,属于变异谱系B1,与全球不同地区HPV6分离株序列的同源性为98.4%~99.9%。1013/HPV6株与B1亚谱系参考株AF092932全基因组序列相比具有19个核苷酸变异位点,分布在7个开放阅读框架(Open Reading Frames,ORFs)和非编码区内。本研究首次分析了分离自中国大陆的HPV6全基因序列特征,研究结果为HPV分子进化的进一步研究和分型诊断试剂的优化提供了数据。

    网络首发时间: 2021-04-22 13:29:24[查看摘要][在线阅读][下载 420K]
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  • LAT基因簇miRNA的CRISPR/Cas9基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响分析

    楚钰淑;滕蔓;周子誉;石彬;郑鹿平;刘金玲;罗俊;张改平

    病毒编码的microRNA(miRNA)在马立克病病毒(MDV)的复制、潜伏感染及诱导肿瘤发生中发挥重要的调控功能。血清1型MDV(MDV-1)编码的26个成熟体miRNA在基因组中形成3个基因簇,分别命名为Meq、Mid和LAT miRNA基因簇。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以超强毒株(vvMDV)国内代表株GX0101为研究对象,设计并合成一系列可实现LAT基因簇miRNA编辑缺失的特异性gRNA组合,成功构建了一株LAT基因簇miRNA缺失毒株GX?LAT-miRs-C21-15。经DNA测序分析、IFA鉴定及RT-qPCR分析,证实LAT基因簇miRNA被完全编辑缺失。该基因缺失毒株传代稳定性良好,miRNA的缺失不影响MDV的体外复制及相关基因表达。本研究基于CRISPR/Cas9系统,获得了稳定的LAT基因簇miRNA编辑缺失毒株,为后续相关miRNA的功能研究奠定了重要基础。

    网络首发时间: 2021-04-16 16:25:57[查看摘要][在线阅读][下载 862K]
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  • 狂犬病疫苗接种者血清对狂犬病病毒中和能力研究

    霍明赫;许炜迪;冯华超;刘婷芳;衣惠鑫;刘艳;涂长春;马继红;冯烨

    狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒属成员(Lyssavirus)引起的人兽共患病,全球99%以上人狂犬病是由该属主要成员狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)引起的。近年来,我国RABV毒株多样性明显增多,但是现有狂犬病疫苗对不同毒株(特别是新出现的毒株)免疫保护效果尚不清楚。为研究目前商品化的人用狂犬病疫苗对RABV街毒株是否具备交叉免疫保护能力,本研究通过制备不同进化群、不同宿主来源的3株街毒株GDMMD16、NMALSF01和NeiMeng927A的细胞毒,分别对免疫过aG株和/或PM株狂犬病疫苗的23份人血清进行狂犬病荧光抗体病毒中和实验,结果发现所有血清对GDMMD16、NMALSF01和NeiMeng927A街毒株的中和效价均高于WHO推荐的标准(0.5IU/mL),表明上述2种商品化的人用狂犬病疫苗对3株RABV街毒株具有保护能力。

    网络首发时间: 2021-04-16 15:49:26[查看摘要][在线阅读][下载 425K]
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  • 4例新型冠状病毒感染病例鼻拭子、咽拭子病毒核酸检测和血浆抗体检测结果分析

    陈荣华;李勤光;赵敏;陈惠聪;康惠玲;柳丽娟

    新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测和血浆抗体检测是目前确诊新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的重要依据。为比较分析SARS-CoV-2感染病例鼻拭子与咽拭子的病毒核酸检测及其血浆病毒抗体检测结果,本研究采用实时荧光定量PCR方法,分别检测4例COVID-19确诊病例鼻拭子与咽拭子标本的SARS-CoV-2 ORF 1ab基因和N基因,并采用胶体金法检测血浆标本中的SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体。结果显示,在4例COVID-19确诊病例中,鼻拭子中病毒ORF 1ab基因及N基因的核酸扩增信号均强于咽拭子,Ct值均低于咽拭子;血浆病毒抗体检测仅发现1例标本SARS-CoV-2 IgG单阳性。本研究结果提示,鼻拭子标本的病毒含量明显高于咽拭子标本,血浆病毒IgM和IgG抗体检测是COVID-19辅助临床诊断的有效工具。

    网络首发时间: 2021-04-08 17:02:37[查看摘要][在线阅读][下载 1162K]
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  • 狂犬疫苗糖蛋白ELISA定量分析方法的建立及验证

    叶珂;张志高;何春辉;方浩霖;林冠峰;卞论;许四宏;吴英松

    为狂犬疫苗生产质量控制建立简便、高效、精准的糖蛋白体外效力分析方法,研制适用于狂犬疫苗生产质量控制的狂犬病毒糖蛋白酶联免疫吸附(ELISA)定量分析试剂。采用双抗体夹心法建立狂犬病毒糖蛋白ELISA定量分析体系,优化反应各项参数后考核试剂性能。线性范围为1~180 mIU/mL,灵敏度为0.4497 mIU/mL,分析内变异系数为5.8%~8.2%,分析间变异系数为7.2%~14.4%。用自制试剂与National Institutes of Health(NIH)动物法平行检测10份疫苗相关样品,两种方法测定结果的相对系数r2为0.8943,相关性良好。自制ELISA试剂各项性能指标良好,且与NIH动物法检测结果相关性良好,有望推广用于狂犬疫苗生产质量控制。

    网络首发时间: 2021-04-08 15:47:19[查看摘要][在线阅读][下载 1298K]
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  • 宿主miRNA参与甲型流感病毒复制调控研究进展

    郭寿清;廖月姣;乔自林;王家敏;李倬;刘振斌

    流行性感冒(简称“流感”)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染疾病,据世界卫生组织统计,流感每年可导致300万严重病例~500万严重病例,其中29万病例~65万病例死亡,给社会带来沉重的经济负担,是一个世界性的公共卫生难题。研究发现宿主细胞中存在多条信号通路参与对流感病毒感染的应答,越来越多的研究表明宿主miRNAs通过直接或间接的方式,在流感病毒感染、复制的不同阶段发挥着重要调控作用。本文综合分析了目前关于宿主细胞miRNA对流感病毒复制调控的研究进展,对不同的miRNA具体的调控机制进行系统地归类总结后发现:甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)的PB1、PB2、NA、NP、M1基因是宿主miRNA直接抑制病毒复制的主要靶基因,而在间接调控过程中宿主miRNA主要作用在RIG-I样受体信号通路,Jak-STAT信号通路和Toll样受体信号通路三条流感病毒应答信号途径中,以上发现将更有助于全面理解宿主miRNA对于流感病毒调控网络和宿主细胞与流感病毒的互作机制。

    网络首发时间: 2021-04-06 09:37:04[查看摘要][在线阅读][下载 522K]
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  • 安徽省2017-2018年手足口病柯萨奇病毒A6型基因进化特征分析

    史永林;葛盈露;马婉婉;陈芳;陈国平;孙永;苏斌

    人肠道病毒A组71型(Enterovirus A71,EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CV-A16)是引起手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)的主要病原体。近年来非EV-A71和非CV-A16的其他肠道病毒(Enterovirus,EV)已成为HFMD流行或暴发疫情的优势病原体。安徽省HFMD监测数据显示,2017-2018年HFMD样本非EV-A71和非CV-A16其他EV核酸阳性率超过50%,其中大部分为柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)。为了解安徽省2017-2018年HFMD其他肠道病毒构成和CV-A6基因进化特征,本研究收集2017-2018年HFMD咽拭子EV核酸阳性标本,采用人横纹肌肉瘤(RD)细胞进行病毒分离培养,对分离到的CV-A6毒株VP1全长序列基因扩增及核苷酸序列测定。从NCBI GenBank数据库下载CV-A6原型株和代表性毒株基因参考序列,运用生物软件MEGA 6.0构建VP1基因序列系统进化树,分析其基因遗传特征。结果显示,安徽省2017-2018年HFMD实验室确诊病例其他EV占66.1%,CV-A16占23.5%,EV-A71占10.4%。52株CVA6毒株均为D3a基因亚型,其VP1区核苷酸序列间相似度为93.7%~100%,编码的氨基酸序列相似度为98.3%~100%;与CV-A6 Gdula原型株核苷酸相似度为78%~82.3%,氨基酸相似度为94.6%~96.3%。VP1区15个氨基酸位点有变异,氨基酸位点Q98L和G160S的变异发生率为100%。其他EV已成为安徽省引起HFMD流行的重要病原体,D3基因型CV-A6为优势流行毒株。持续加强其他EV的病原学监测与分析,对安徽省HFMD防控策略制定与疫情处置具有重要意义。

    网络首发时间: 2021-04-02 15:18:59[查看摘要][在线阅读][下载 610K]
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  • 基于GII.4型诺如病毒P蛋白的GII型广谱单克隆抗体制备及应用

    高珺珊;薛亮;蔡伟程;廖颖茵;左月婷;张菊梅;吴清平

    人源诺如病毒(Human noroviruses,HuNoVs)是全球引起急性胃肠炎的重要传染病原。该病毒遗传多样性丰富,包括了5个基因群以及39种基因型,免疫学检测受限。因此,本研究旨在制备广谱性的HuNoV单克隆抗体,并建立可检测多种基因型的双抗体夹心ELISA方法。本研究通过表达纯化流行毒株GII.4型HuNoVs衣壳蛋白P颗粒免疫Balb/c小鼠,筛选出3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体并进行评价。利用辣根过氧化物酶对抗体进行标记及配对筛选,建立了HuNoVs双抗夹心ELISA检测方法,并进行验证。结果显示:B10、1D6、1C1细胞株可分泌广谱性单克隆抗体。所建立的双抗夹心ELISA方法酶标抗体最佳工作浓度为1∶5 000,捕获抗体最佳包被浓度为2.0μg/mL,该方法检测GII.4型P颗粒最低检出限为125.0ng/mL,对常见HuNoVs GII.2、GII.3、GII.4、GII.6、GII.17基因型样本均能检出,而与轮状病毒、星状病毒、肠道病毒、札幌病毒无交叉反应。批间与批内重复变异系数均小于7%。临床样本检测结果显示,本方法与荧光定量RT-PCR结果的符合率为84%。本研究成功制备了广谱性的HuNoVs衣壳蛋白单克隆抗体,建立了可应用于HuNoVs流行毒株基因型的双抗夹心ELISA检测方法,为HuNoVs的诊断及流行病学调查提供了一种简便、特异的免疫学方法。

    网络首发时间: 2021-03-30 14:53:11[查看摘要][在线阅读][下载 563K]
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  • 盖塔病毒研究进展

    王玉玲;米勇;江朝源;黄瑶;谷思睿;朱玲;徐志文

    盖塔病毒(Getah virus,GETV)是披膜病毒科甲病毒属的虫媒病毒。GETV感染已在多种脊椎动物中发现,包括人类、猴子、鸟类、猪、马和其他哺乳动物。GETV感染可导致马出现发热、全身皮疹和腿水肿,仔猪关节炎和母猪生殖障碍等。目前GETV在世界范围内流行较为广泛,近年来逐步在猪群中暴发,导致部分猪场经济损失严重,同时在中国感染的宿主范围不断扩大,相继出现了第一例狐狸、猪、马、牛感染。本文对GETV的分子结构、致病机制、宿主范围、流行状况以及疫苗研究进展进行综述,以期为我国GETV的深入研究及防控工作提供一定思路。

    网络首发时间: 2021-03-23 14:28:10[查看摘要][在线阅读][下载 431K]
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  • GICA和CLIA联合检测SARS-CoV-2特异性抗体的检测策略研究

    卢小岚;汪光蓉;牟代勇;杜琴;郭晓兰;王强

    评价胶体金免疫层析法(GICA)与化学发光法(CLIA)联合检测对降低新型冠状病毒(SARS-CoV-2)特异性抗体假阳性的效果。收集2020年1月22日至2020年3月5日就诊于川北医学院附属医院及南充市中心医院的19例SARS-CoV-2确诊患者不同时段的血清33份,55例非SARS-CoV-2、其他病原体感染及自身免疫性疾病患者的血清55份,采用GICA和CLIA分别对血清SARS-CoV-2 IgM、IgG进行检测,并对结果进行分析。GCIA检测SARS-CoV-2 IgM、IgG的敏感性分别为100.0%、94.74%,与CLIA(92.86%和100.0%)比较没有差异(P>0.05);GCIA检测SARS-CoV-2 IgM、IgG的特异性分别为70.91%、74.55%,明显低于CLIA的特异性(98.18%和89.09%)(P<0.01);两种方法检测SARS-CoV-2 IgM、IgG结果具有一致性(P<0.001),Kappa值分别为0.434,0.406;ROC曲线分析发现,GCIA检测SARS-CoV-2 IgM、IgG的AUC分别为0.855、0.846,明显低于CLIA(0.955和0.945)(P<0.05)。两种方法联合检测SARS-CoV-2 IgM、IgG的敏感性分别为92.86%、94.74%,特异性分别为100.0%、100.0%;ROC曲线分析显示,联合检测SARS-CoV-2 IgM、IgG的AUC分别为0.964、0.974,高于两种方法的单独检测。GICA和CLIA联合检测能有效提高SARS-CoV-2 IgM和IgG的检测特异性,值得临床推广应用。

    网络首发时间: 2021-03-19 13:11:26[查看摘要][在线阅读][下载 493K]
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  • 伪狂犬病毒潜伏感染相关病毒因子研究进展

    谷思睿;赵军;陈弟诗;黄瑶;王玉玲;徐雷;周莉媛;朱玲;徐志文

    伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)属于α-疱疹病毒亚科,能够在猪体内建立并维持终身潜伏感染状态。潜伏感染的定期重新激活或间歇性活性循环给PRV疫病防控和净化带来巨大困难,给养猪业造成严重的经济损失。随着对α-疱疹病毒致病机制和潜伏感染机制的深入研究,近年来关于PRV潜伏感染相关转录本(Latencyassociated transcripts,LATs)研究增多,但由于病毒潜伏和激活过程涉及复杂的病毒与宿主相互作用关系,很多潜伏感染具体机制仍然不明确。因此本文重点讨论了近年来PRV潜伏感染相关病毒因子的研究进展,对PRV LAT的功能和其在潜伏感染中可能涉及的分子机制进行梳理;同时α-疱疹病毒各成员之间显著的同源性也为PRV潜伏感染和启动再激活因素的探究提供了新见解,以期为深入研究宿主抗PRV潜伏感染提供参考。

    网络首发时间: 2021-03-19 10:46:38[查看摘要][在线阅读][下载 515K]
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  • 通过反向遗传操作技术构建传染性支气管炎病毒nsp15核酸内切酶活性缺陷型重组毒株

    翁文莲;宫晓倩;高波;方守国;王欢;钱琨;丁铲;廖瑛

    冠状病毒编码保守的核酸内切酶nsp15(Non-structural protein 15),参与拮抗干扰素反应。传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)属于γ属冠状病毒,其nsp15的功能尚未得到解析。为探讨nsp15在IBV感染和复制过程中的作用,本研究对nsp15的核酸内切酶活性中心H238进行突变,通过体外连接技术构建重组病毒rIBV-nsp15-H238A,并对病毒滴度、感染复制能力和生长曲线进行鉴定。方法如下:将IBV Beaudette-R毒株的基因组分成5个片段克隆到质粒载体,并在每个片段加上BsaI或BsmBI限制性酶切位点。通过质粒载体进行扩增后,通过酶切获得cDNA片段,在体外连接成全长基因组cDNA,转录出全长基因组RNA,跟N的转录本一起电击转染到Vero细胞,拯救出重组病毒rIBV和rIBV-nsp15-H238A。利用空斑试验检测比较rIBV和rIBV-nsp15-H238A的病毒滴度和空斑大小,鉴定nsp15核酸内切酶活性对IBV感染性的影响。结果显示,rIBV-nsp15-H238A的病毒滴度为2.7×10~6PFU/mL,比rIBV的病毒滴度(9.4×10~6PFU/mL)低3倍有余,且rIBV-nsp15-H238A空斑孔径远小于rIBV,说明rIBV-nsp15-H238A复制和扩散能力远低于rIBV。利用TCID_(50)检测病毒的生长曲线,结果表明在感染后0~24h,rIBV-nsp15-H238A的生长曲线均低于rIBV。由此可见,IBV nsp15H238核酸内切酶活性位点对IBV的感染复制起着重要作用。本研究通过反向遗传操作构建nsp15核酸内切酶活性缺陷型重组病毒,为研究nsp15的功能提供了一个有力的工具。

    网络首发时间: 2021-03-11 17:29:08[查看摘要][在线阅读][下载 648K]
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  • 麻疹疫苗研究新进展

    李焱;张勇;许松涛

    麻疹是由麻疹病毒引起的传染性很强的急性发热出疹性疾病,好发于5岁以下的儿童,近年来成年人发病有所增加。随着全球麻疹发病率升高,我国二胎政策放开,麻疹的预防更显重要,而疫苗免疫是麻疹控制和消除最重要的策略。本文就麻疹的流行病学、现行麻疹疫苗和在研疫苗的安全性、有效性和稳定性及疫苗应用面临的问题进行综述,为我国新型麻疹疫苗研发和麻疹预防提供基础性资料。

    网络首发时间: 2021-03-01 10:32:19[查看摘要][在线阅读][下载 577K]
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  • 猪流行性腹泻病毒单克隆抗体及其抗原表位的研究进展

    张志榜;彭维祺

    猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(PED virus,PEDV)引起的一种严重危害养猪生产的常见疫病。近年来,由于新的PEDV变异毒株的出现,许多国家的养猪业遭受了巨大的经济损失。PEDV也因此受到更多关注,关于PEDV的研究报道也日渐增多。基于国内外有关PEDV的最新研究进展,本文系统归纳和分析了PEDV结构蛋白和非结构蛋白单克隆抗体以及单克隆抗体识别的特异性抗原表位,以期为开发鉴别诊断方法和表位疫苗等提供信息。

    网络首发时间: 2021-03-01 09:09:00[查看摘要][在线阅读][下载 517K]
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  • 肠道病毒71型致神经元病变的机制研究进展

    陈天扬;刘正芸;王欢

    中枢神经系统感染是由病原体侵犯中枢神经系统引起的一类具有较高的发病率和死亡率的疾病。病毒是引起中枢神经系统感染的重要病原体之一,其中肠道病毒71型在继发神经系统症状的重症手足口病患儿中较为常见。EV71致神经元病变是其感染中枢神经系统的基础,阐明肠道病毒71型致神经元病变的机制,不仅可以促进基础病毒学研究,也能为抗病毒药物的开发提供思路,对临床肠道病毒71型致中枢神经系统感染的治疗提供支持。本文主要从肠道病毒71型侵入神经元的受体途径、损伤神经元的线粒体途径、诱导凋亡与自噬、感染胶质细胞后对神经元的旁观者效应、免疫病理机制以及病毒自身因素等多个方面,对肠道病毒71型致神经元病变机制展开综述。

    网络首发时间: 2021-02-26 09:16:54[查看摘要][在线阅读][下载 962K]
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  • 猪塞内卡病毒病原学研究进展

    陶倩;曹飞;彭珂楠;朱玲;徐志文

    2014年以来,巴西、美国、中国、泰国等多个国家相继暴发了塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)疫情,且流行范围呈扩大趋势,SVA逐渐成为研究和关注的热点。本文主要从SVA病毒蛋白结构功能、入侵机制、适应性免疫反应及免疫逃逸等方面对SVA相关病原学研究进行综述,以期为进一步开展猪SVA的致病机制研究以及疫苗研发提供帮助。

    网络首发时间: 2021-02-25 14:46:28[查看摘要][在线阅读][下载 547K]
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  • 抗GII.3型诺如病毒阻断型单克隆抗体的制备和鉴定

    霍玉奇;郑礼钧;刘金瑾

    诺如病毒(norovirus,NoV)是引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一。目前国内外还没有关于抗GII.3NoV组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)阻断型单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的报道,本研究制备了抗GII.3型NoV HBGA阻断型mAbs,并对这些抗体特性进行了初步的鉴定。采用纯化的GII.3型(GenBank登录号:KY767665)NoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)免疫BALB/c小鼠。将GII.3,GII.4(GenBank登录号,KF306214),GII.3S/GII.6P,GII.6S/GII.3P,GII.4-VP1/GII.3-P2主要衣壳蛋白(VP1)抗原或嵌合抗原作为包被抗原采用间接ELISA方法分别对细胞克隆株进行筛选,采用体外HBGA-VLP结合阻断实验对筛选的mAbs进行阻断活性鉴定,利用基于涵盖GII.3突环区(protruding domain,P区)的重叠多肽ELISA和western blot(WB)对阻断抗体结合位点进行特性分析。体外HBGA-VLPs阻断实验显示三株细胞分泌抗体具有阻断活性。挑选目标株制备腹水并对mAbs进行纯化。WB结果显示三株HBGA阻断型mAbs只识别非变性的GII.3 VP1蛋白;基于GII.3 P区重叠多肽的间接ELISA结果显示三株HBGA阻断型mAbs与被检测多肽无结合活性。本研究制备了具有HBGAs阻断活性的GII.3 NoV特异性mAbs,全部只识别非变性的GII.3 VP1蛋白,且结合位点位于GII.3 VP1 P2区。抗GII.3 NoV HBGAs阻断型mAbs的获得为后续研究GII.3 NoV的进化、感染机制和HBGAs结合位点提供了原材料。

    网络首发时间: 2021-02-24 13:56:42[查看摘要][在线阅读][下载 485K]
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  • 2018-2019年福州腹泻住院儿童A组轮状病毒全基因组分析

    黄枝妙;吴冰珊;林琦;林卫东;翁育伟

    了解2018-2019年福州市五岁以下腹泻住院儿童标本中A组轮状病毒(RVA)基因组特征。通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对49份RVA阳性标本进行核酸扩增,对扩增到的40份标本进行全基因组二代测序,获得G1P[8]型RVA毒株7株,G9P[8]型RVA毒株33株。根据VP7节段分型,40株RVA毒株中有30株G9-Ⅵ亚型、3株G9-Ⅲ亚型和7株G1-Ⅰ亚型;根据VP4节段分型,40株RVA毒株均属于P[8]-3亚型。全基因组核苷酸序列分析表明,除了VP7节段外,序列差异比较大的有NSP4和NSP1两个节段。本研究获得11株G9P[8]型Wa-like株(G9-P[8]-I1-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E1-H1),22株NSP4节段重配的G9P[8]-E2株(G9-P[8]-I1-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E2-H1),在测序的33株G9P[8]型RVA毒株中G9P[8]-E2重配株占66.7%。7株G1P[8]型RVA毒株均为Wa-like株。研究结果表明,2018-2019年福州地区流行的RVA毒株中G9P[8]-E2重配株已经成为优势株,为了更全面了解福州地区RVA毒株的遗传变异情况,后续还需加大标本量持续进行监测。

    网络首发时间: 2021-02-24 10:43:35[查看摘要][在线阅读][下载 594K]
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  • 猪δ冠状病毒主要蛋白功能研究进展

    黄瑶;曹飞;李凤琴;谷思睿;王玉玲;岳健国;徐志文;周远成;朱玲

    猪δ冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是冠状病毒科,δ冠状病毒属成员,为单股正链RNA病毒。由于猪δ冠状病毒是一种新型肠道冠状病毒(于2012年首次报道),目前对其研究较少,缺少商品化的疫苗。对疫病的防控无疫苗可用,一旦发病,会对猪场造成严重损失。本文综述了已有的关于猪δ冠状病毒结构蛋白、辅助蛋白、非结构蛋白等的特点和功能,以期为深入研究PDCoV致病机制和免疫机理提供参考,从而有助于其疫苗研发。

    网络首发时间: 2021-02-23 17:22:45[查看摘要][在线阅读][下载 489K]
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  • 寨卡病毒检测研究进展

    那琳;许梅花

    寨卡病毒病是近年来在非洲、亚洲、南美洲等地流行的一种隐性传染病。该病由寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染导致,虽然患者或携带者的病情并不明显,或在短期内很难察觉。但由于近些年来的突然流行,患者数目的急剧增加,而且各国间贸易往来愈加繁荣,亦加快了该疾病流行的步伐。疾病的防治离不开确切的诊断,如何快速、准确检测出寨卡病毒不容小觑,是急需解决的世界性难题之一。

    网络首发时间: 2021-02-05 08:38:44[查看摘要][在线阅读][下载 407K]
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  • 引起一起暴发性急性胃肠炎疫情的埃可病毒型基因特征分析

    周健明;谢显清;方苓;金玉娟;曾汉日;李静媚;刘凤仁;李彩霞;李晖;刘渠;张勇;郑焕英

    埃可病毒18型(Echovirus 18,E18)属于B组肠道病毒(Enterovirus B,EV-B),是引起病毒性脑膜炎的重要病原体。对2019年4月广东省深圳市龙岗区一起急性胃肠炎疫情进行病原学鉴定及病原基因特征分析。此次疫情共有26名患者,均以发热、呕吐、腹泻、腹痛为主要症状。从其中18名病例采集了18份肛拭子标本,采用实时荧光RT-PCR、病毒分离(RD细胞)和半巢式聚合酶链反应法以鉴定病原,扩增病毒全长VP1区,测序并进行系统进化分析。结果显示,18份标本中11份肠道病毒核酸阳性,其中8份为E18。病毒分离得到2株病毒,从肛拭子标本直接扩增得到的7条E18全长VP1核苷酸序列,核苷酸相似性为100%,与GenBank中E18参考株的核苷酸及氨基酸同源性分别为79.2%~96.4%和93.3%~99.3%;进化树显示,深圳龙岗E18分离株(GDSZ1902)归属由中国分离株组成的C2a进化分支,在其VP1蛋白中的底部环处发现一处特异的氨基酸变异(D200N)。从流行病学和病原学结果分析,E18是引起本次深圳市龙岗区急性胃肠炎疫情的主要病原,属于中国E18主要流行株的进化分支,这是我国首次发现E18引起急性胃肠炎疫情的报道。

    网络首发时间: 2021-01-04 15:53:20[查看摘要][在线阅读][下载 822K]
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  • EB病毒的发现:偶然之中的必然

    夏巍;赖永静;杜龙;王梦琳;王红;戢克铜;冯清源;唐安洲

    肿瘤作为威胁人类健康的第一大杀手,自发现伊始全球科研工作者对于其病因的求索就从未停止过。1958年英国外科医师Denis Parsons Burkitt在乌干达医院观察到一种独特类型的肿瘤,1964年Michael Anthony Epstein和Yvonne Barr利用电子显微镜在这种特殊肿瘤的活检组织细胞中观察到一种类似疱疹病毒颗粒的新病毒,并将其命名为EB病毒,这无疑为肿瘤的病因研究开启了一扇新的大门—病毒与肿瘤。EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)的发现是医学史上一项革命性的发现,如同许多其它伟大发现一样,EB病毒的发现之旅充满了曲折艰辛,亦不乏机缘巧合,例如Denis Parsons Burkitt与Michael Anthony Epstein具有决定性作用的会面,一个是外科医师,一个是动物病毒学家;一个在贫穷落后的非洲乌干达,一个在正值百花齐放、百家争鸣的英国伦敦,似乎是命运的安排才让两个看似毫不相干的人得以相见。这样的“偶然”还有很多。然而,当我们详尽的了解这趟不同寻常的旅程之后发现每一个巧合或是偶然背后都有着必然,这种必然来源于他们对真理的坚持,对细节的专注,以及敢于推陈出新的创新精神。探寻EB病毒的发现过程,不仅可以更加全面的了解EB病毒,丰富科研知识,更重要的是对前辈们优秀品质的继承和发扬。

    网络首发时间: 2019-03-15 10:50:34[查看摘要][在线阅读][下载 442K]
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  • 五株人冠状病毒NL63的基因型鉴定及S1 domain基因特征分析

    何佩;崔爱利;徐瑾;高立冬;余鹏博;孙凯旋;许文波;许晓光

    为阐明我国部分地区人冠状病毒(Human coronavirus,HCoV)NL63基因特征,本研究对2013年陕西省、2018年河南省和湖南省送检的5株HCoV-NL63核酸检测阳性的呼吸道样本进行HCoV-NL63基因型别鉴定及S1 domain基因特征分析。通过对HCoV-NL63棘突蛋白(Spike glycoprotein,S)基因的S1 domain区域进行基因扩增和序列测定,同时结合GenBank数据库下载的1983~2018年其他国家74条HCoV-NL63代表株序列和2007~2010年中国流行的12条HCoV-NL63代表株序列,构建基因亲缘性关系树,并对S蛋白的S1 domain区域进行核苷酸序列比对分析。结果提示全球HCoV-NL63流行株可划分为A和B两个基因型;A基因型可进一步划分为A0,A1,A2和A3四个基因亚型,其中本研究将GenBank中2008年中国流行的2株HCoV-NL63毒株划分为新基因亚型(A3);B基因型可进一步划分为B0,B1和B2三个基因亚型。A和B基因型的HCoV-NL63代表株序列在地域分布上无明显差异,但A基因型不同基因亚型的HCoV-NL63序列在年代分布上呈现出一定的时间进化趋势。在我国A和B基因型HCoV-NL63均已被检测到,但主要以A基因型流行为主,且主要集中在A1和A2基因亚型。不同基因型HCoV-NL63序列在S1 domain区域核苷酸和氨基酸序列上存在特征性差异。本研究通过对五株HCoV-NL63基因型鉴定及S1 domain基因特征分析,初步阐明了我国部分地区流行的HCoV-NL63基因型/基因亚型分布情况及基因特征,丰富了我国本土流行的HCoV-NL63基因数据库,为我国HCoV-NL63分子流行病学研究及分子检测和监测技术的改进和验证提供了基础基因数据。

    网络首发时间: 2019-03-08 15:54:24[查看摘要][在线阅读][下载 563K]
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