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  • 中国精品科技期刊证书

    <正>病毒学报根据中国精品科技期刊遴选指标体系综合评价结果,贵刊入选"第4届中国精品科技期刊",即"中国精品科技期刊顶尖学术论文(F5000)"项目来源期刊。有效期:2017年10月-2020年12月。特此证明。

    2020年04期 v.36 536页 [查看摘要][在线阅读][下载 317K]
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新型冠状病毒研究专题论著

  • 新型冠状病毒抗体检测试剂的临床性能评估方案

    黄悦;吴婷;杜珩;葛胜祥;陈毅歆;夏宁邵;龚文峰;张军;

    新型冠状病毒肺炎(COVID-19)已在全球形成大流行,目前其确诊主要依靠病毒核酸检测,但核酸检测存在漏诊及对检测条件要求较高等不足。与核酸检测相比,抗体检测通常具有普及面广、样品采集便捷、容易实现高通量、成本低等优点,与核酸检测联合应用可有效弥补核酸检测的缺陷。本研究设计了评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体检测试剂盒的详细方案,包括对研究对象、样本量评估、纳入及排除标准、盲法设计、实验标本、伦理、研究管理及质量控制、数据管理与统计分析、结果报告的具体内容和考量,旨在帮助使用者在大规模应用抗体检测试剂前系统地评估抗体检测试剂的灵敏度、特异度等关键临床性能,以根据各自的检测目的在不同抗体检测试剂中做出合理的选择提供参考。

    2020年04期 v.36 541-548页 [查看摘要][在线阅读][下载 1234K]
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  • 重庆大足区新型冠状病毒肺炎患者出院后病毒核酸随访结果

    杨静;董剑;杨春燕;冯娅;薛莲;夏晓影;

    对重庆大足区新型冠状病毒肺炎确诊患者进行出院后病毒核酸随访,以明确复阳率及可检出病毒标本类型。对所有确诊患者进行定点隔离观察14d,之后再居家隔离4周,期间定期采集鼻咽拭子、口咽拭子、粪便、唾液和尿液5种标本进行新型冠状病毒核酸检测,同时密切关注病情变化。14人中共有6人复阳,3人为一过性复阳,另3人从出院到复阳时间间隔3~14d,持续12~18d后转阴,复阳患者未出现新临床症状且原有症状未加重,实验室检查和胸部CT平扫结果均无明显异常。其余8人截至隔离期结束均未复阳,未出现新型冠状病毒肺炎相关临床症状,实验室检查和影像学无异常。复阳患者中有2人的唾液标本中检出新型冠状病毒核酸。我区新型冠状病毒肺炎患者复阳比例较高,且新发现复阳患者唾液标本中携带新型冠状病毒,但是否具有感染性需要进一步验证。

    2020年04期 v.36 549-553页 [查看摘要][在线阅读][下载 909K]
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  • 3例COVID-19出院后核酸复检阳性患者的检测分析

    秦维超;孙贵银;张运洪;袁进;邹静波;成文;

    新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测是新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病例确诊的金标准,血清抗体检测是重要辅助手段。本文对重庆市江津区中心医院3例COVID-19出院后核酸复检阳性患者,回顾性分析在疾病初期确诊、治疗出院、转诊隔离全程诊疗过程中患者临床病例及其核酸和抗体检测结果,结合患者体内新冠病毒核酸确诊到完全转阴时间变化,初步探讨COVID-19临床治愈出院患者核酸和抗体检测与疾病传染性因素的相关性,为新冠肺炎患者治疗康复过程的病毒感染监测提供参考。

    2020年04期 v.36 554-559页 [查看摘要][在线阅读][下载 904K]
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  • 新型冠状病毒肺炎的疫情趋势预测

    颜铭江;董一鸿;贾香恩;郑海阳;辛宇;

    2019年12月以来,湖北省武汉市部分医院陆续发现了多例不明原因肺炎病例,现已证实为新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 2019,COVID-19)。全国各地采取了前所未有的措施,大力开展疾病救治和防疫工作。本文收集中国国家卫生健康委员会公布的官方统计数据预测疫情走向。传统SEIR模型中仅考虑病例和处于潜伏期的感染者,病例具有传染性而潜伏者无传染性;事实上,新冠肺炎确诊患者在医院中隔离无法对外界易感人群造成感染,有研究表明处于潜伏期的感染者可能具有传染性。因此,本研究提出了改进的传染病传播模型—ISEIR,将患者分为未收治的发病患者(具有传染性)和已收治的确诊患者(不考虑传染性),并考虑处于潜伏期的感染者具有传染性;以历史数据动态拟合模型参数,来摆脱固定参数的局限性。在数据预处理中根据每日有效再生数的概率分布将2020年2月12至14日这三天的临床诊断数据进行预处理,摊入到前期数据中。疫情分成全国(湖北省外)和湖北省两大区域分别进行探讨,通过新模型ISEIR预测今后疫情的进一步发展,并计算每日的有效再生数变化。结果显示,湖北省的有效再生数从3.108逐渐降低,2020年4月19日所有患者将全部治愈出院,累计确诊患者为66 487人;全国(湖北省外)的初始有效再生数为1.929,小于湖北省,2020年3月26日所有患者全部治愈,累计确诊患者13 270人。从结果中可以发现,在严格的防控措施下疫情得到了有效抑制,验证了目前防控措施的有效性,但仍需要防止复工潮引起的疫情反弹。

    2020年04期 v.36 560-569页 [查看摘要][在线阅读][下载 2440K]
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  • 尿素解离法降低新型冠状病毒IgM和IgG检测结果假阳性的效果评价

    汪光蓉;牟代勇;卢小岚;杜琴;张兵;王强;郭晓兰;

    探讨引起新型冠状病毒(SARS-CoV-2)免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)抗体检测结果假阳性的干扰因素,改良检测方法,完善实验室检测方案。本研究收集2020年1月2日至2020年3月5日就诊于川北医学院附属医院及南充市中心医院的门诊及住院患者血清样本共74份,其中19例为SARS-CoV-2核酸检测确诊阳性,10例为其他呼吸道病毒IgM抗体阳性,10例肝炎病毒抗体IgM阳性,20例类风湿因子IgM阳性,15例抗核抗体阳性。采用胶体金免疫层析法(试剂A、试剂B)分别对研究对象血清进行SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体检测,并对结果为SARS-CoV-2 IgM或SARS-CoV-2 IgG阳性的病例进行分析,发现造成检测结果假阳性的可能因素。再采用合适浓度的尿素对检测为阳性结果的血清及3例SARS-CoV-2 IgM阳性的COVID-19早期患者血清进行解离,解离后分别重新测定SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体。采用SPSS19.0统计软件对数据进行统计学分析。结果显示,19例COVID-19确诊患者血清中,试剂A检出SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体阳性数为15例及18例,试剂B检出SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体阳性数均为12例;20例类风湿因子IgM阳性患者血清中,试剂A检出SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体阳性数为16例及14例;15例高滴度ANA阳性患者血清中,试剂B检出4例SARS-CoV-2 IgG抗体阳性。尿素解离浓度为2 mol/L时,试剂A检出的RF-IgM阳性血清中的16例SARS-CoV-2 IgM抗体有14例转阴,14例SARS-CoV-2 IgG抗体有13例转阴,而试剂A在COVID-19确诊患者血清中检出的SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体均未出现阴转;尿素解离浓度为4 mol/L时,试剂B检出的ANA阳性血清中的4例SARS-CoV-2 IgG抗体全部转阴,而在COVID-19确诊患者血清中检出的的SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体均未出现阴转。另外,经过尿素解离后,试剂A和试剂B在3例COVID-19早期患者血清中检出的SARS-CoV-2 IgM抗体也都未出现阴转。本研究提示,IgM型类风湿因子易造成试剂A检测血清SARS-CoV-2 IgM、IgG结果的假阳性;高滴度的ANA抗体也会引起试剂B检测血清SARS-CoV-2 IgG结果的假阳性。对检测结果假阳性的样本,采取尿素解离方案,能有效降低检测过程中假阳性发生的概率;尿素解离法对COVID-19患者发病早期标本检测灵敏度的影响尚待进一步深入研究。

    2020年04期 v.36 570-577页 [查看摘要][在线阅读][下载 1999K]
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  • 对383份鸟类样品检测未发现SARS-CoV-2阳性

    刘昊;李丽霞;王海军;司兴奎;孙文超;许强;白雪;

    2019年12月以来,全球大面积发现了由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情,病毒溯源一直是研究的重点。目前在畜禽和毛皮动物中均未检测出病原,而关于SARS-CoV-2在珍禽和濒危候鸟的溯源性研究至今尚未报道。本研究收集了2019-2020年吉林省内绿头鸭、白羽鸭、雉鸡、鸿雁、白天鹅等10种珍禽和濒危候鸟的咽拭子、肛拭子和粪便样品共383份。通过WHO推荐Real-time RT-PCR方法对上述样品中SARS-CoV-2进行检测。结果显示,383份样品中SARS-CoV-2核酸检测结果均为阴性。

    2020年04期 v.36 578-580页 [查看摘要][在线阅读][下载 875K]
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流感病毒研究论著

  • H7N9流感病毒感染神经系统相关细胞特征分析

    丁小满;雷雨璇;杨国樑;王昕;武伟华;吕燕;刘慧;孙颖;彭博;刘岚铮;房师松;

    H7N9流感病毒感染人类不仅可以侵犯呼吸系统,偶尔还会侵犯中枢神经系统引发流感病毒性脑病(Influenza-associated encephalopathy,IAE)。IAE是引起H7N9感染者死亡的重要因素,但其致病机制尚未阐明。为研究H7N9流感病毒引发IAE的致病机制,本研究以小鼠小胶质细胞(Bv2)以及小鼠神经瘤母细胞(N2a)为研究对象,细胞免疫荧光激光共聚焦显微镜观察Bv2、N2a细胞上流感病毒相关受体SA-α2,6-Gal、SA-α2,3-Gal分布;微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测H7N9感染Bv2、N2a细胞扩增情况;液相芯片法检测H7N9感染Bv2、N2a细胞后细胞因子分泌情况。结果显示,Bv2、N2a细胞上都有流感病毒感染相关受体SA-α2,6-Gal、SA-α2,3-Gal的分布。H7N9流感病毒可以成功感染Bv2、N2a细胞,且病毒在Bv2细胞内的扩增效率明显高于N2a细胞。H7N9感染Bv2细胞后出现部分细胞因子分泌量升高现象,而感染N2a细胞后未出现。本研究成功建立了H7N9流感病毒感染Bv2以及N2a细胞模型,为探讨H7N9引发IAE致病机制研究奠定了基础。

    2020年04期 v.36 581-587页 [查看摘要][在线阅读][下载 12990K]
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  • 广州市两株人感染H5N6禽流感病毒全基因组序列特征分析

    曹蓝;李魁彪;刘艳慧;陆剑云;陈艺韵;苏文哲;鲁恩洁;夏丹;狄飚;张周斌;

    H5N6禽流感是重要的人兽共患病,给公共卫生带来严重威胁。为研究人感染H5N6禽流感病毒的基因特征,本文对广州市两株人感染H5N6禽流感病毒进行全基因组序列扩增,应用生物信息学软件分析分子变异和遗传进化特征。结果显示:两毒株各基因片段同源性存在差异,血凝素(Hemagglutinin,HA)基因同源性最高为98.3%,PB2基因同源性最低为85.2%。A/Guangzhou/41641/2014(H5N6)病毒的HA、神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)、聚合酶碱性蛋白2(Polymerase basic protein 2,PB2)基因与猫源毒株A/feline/Guangdong/1/2015(H5N6)亲缘关系较近,推测可能起源于共同祖先。两株病毒均为禽源高致病性病毒,HA和NA表面蛋白受体结合位点、裂解位点和耐药位点未发生变异。内部基因重要位点均有不同程度的变异,其中以41641病毒变异较大,并发生PB2蛋白E627K突变。两株病毒均发生与不同亚型病毒之间的重组现象,41641病毒的内部基因分别与H5和H9N2/H7N9发生重组,其中PB2和PB1基因分别与2013年暴发的华南分支和华东分支H7N9禽流感病毒亲缘关系相近,A/Guangzhou/37845/2015(H5N6)病毒的内部基因与H5N1/H5N6病毒发生重组。因此,广州市两株人感染H5N6禽流感病毒进化起源不同,属于两种不同的基因型,本研究推测2013年暴发的H7N9禽流感病毒在新型H5N6重组病毒的进化过程中起到重要作用。

    2020年04期 v.36 588-599页 [查看摘要][在线阅读][下载 1124K]
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  • PB2蛋白T271A突变增强了欧亚类禽猪流感病毒在小鼠中的致病力

    冯兆民;朱闻斐;周丽娟;李希妍;刘佳;高荣保;王大燕;舒跃龙;

    目前,欧亚类禽猪流感病毒(Eurasian avian-like H1N1 swine influenza viruses,EA H1N1 SIVs)在我国猪群中广泛流行,同时可跨越种属屏障感染人。PB2-T271A是H5N1、H7N9和2009年甲型H1N1流感病毒中关键的分子标记,可增加病毒在小鼠中的致病力。但是,PB2-T271A对EA H1N1 SIVs的影响尚不清楚。在本研究中,我们分析了PB2-T271A突变对EA H1N1 SIVs在细胞和小鼠中复制能力的影响。本研究发现,PB2-T271A突变增加了EA H1N1 SIVs在哺乳动物细胞和禽细胞中的复制能力,增加了EA H1N1 SIVs在小鼠中的致病力。此外,PB2-T271A突变增加了EA H1N1 SIVs的聚合酶活性。因此,我们应该加强对EA H1N1 SIVs中PB2-T271A位点的监测。

    2020年04期 v.36 600-609页 [查看摘要][在线阅读][下载 1839K]
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病毒检测方法研究专题论著

  • 寨卡病毒RNA恒温快速扩增检测方法的建立

    朱禹;李阿茜;刘洋;李乃哲;余东阳;李川;李建东;王世文;李德新;梁米芳;柳燕;

    2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经优化建立了多种功能蛋白介导的ZIKV RNA恒温快速扩增检测方法。利用所制备的ZIKV NS1片段体外转录RNA作为参考品,并与实时荧光定量RT-PCR检测结果进行比较。同时利用ZIKV细胞培养物中加入健康人血清制备的模拟临床标本进行初步验证。结果显示,建立的RNA恒温快速扩增检测方法可100%检出100拷贝/μL体外转录RNA,可在15 min以内判读,大大低于PCR的常规检测时间;用该方法检测其他相关病毒,无交叉反应。病毒滴度在(10~4~10~7PFU/mL)之间的模拟临床病人标本可达到100%检出。本研究建立的ZIKV RNA恒温扩增快速检测方法快速、灵敏、特异,适用于ZIKV现场应急检测,为ZIKV的防控提供了重要的技术支撑。

    2020年04期 v.36 610-616页 [查看摘要][在线阅读][下载 2202K]
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  • 北美洲流行汉坦病毒多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

    李乃哲;李阿茜;李建东;李德新;梁米芳;王世文;

    为了建立牛轭湖病毒(Bayou virus,BAYV)、纽约病毒(New York virus,NYV)、厄尼诺洛峡谷病毒(El Moro Canyon virus,ELMCV)以及岛景病毒(Isla Vista virus,ISLAV)四种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术,本研究选用上述四种病毒的N蛋白基因作为靶标区域设计四组特异性引物探针,建立四重实时荧光定量RT-PCR检测方法。用四种病毒体外转录RNA进行灵敏度和重复性验证,并使用其他病毒细胞培养物及体外转录RNA进行特异性验证。结果显示,四重实时荧光定量PCR扩增效率均可达到95%以上,四种病毒体外转录RNA灵敏度介于1~10拷贝/μL,与单重检测方法无明显差异,且与其他病毒无交叉反应。稳定性评价结果显示,批内、批间变异系数均在3%以内。本研究所建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于相关样本的诊断与筛查。

    2020年04期 v.36 617-623页 [查看摘要][在线阅读][下载 3262K]
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  • 9种呼吸道病毒微流体芯片检测体系构建与应用

    陈峰;吴海磊;徐聪灵;唐晓宇;杨国平;刘文干;

    近年来,越来越多新的致病性呼吸道病毒被发现,给口岸检验检疫机构的预防和控制造了成极大困扰,建立甲型流感病毒(Influenza A virus,FluA)、乙型流感病毒(Influenza B virus,FluB)、副流感病毒(Human Parainfluenza virus,HPIV)、冠状病毒(Coronavirus,Cov)、呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)、人偏肺病毒(Humanmetapneumovirus,HMPV)、人博卡病毒(Human bocavirus,Hbov)、腺病毒(Adenovirus,Adv)和鼻病毒(Rhinovirus,Rhv)9种呼吸道病原体微流体芯片检测体系。选择人β-actin基因作为靶基因设计内标引物探针,根据9种呼吸道病原体基因组的保守区设计相应的引物探针;在Ultra Fast Labchip Real-time PCR V280平台上,筛选合适的RT-PCR Master Mix;对扩增体系中引物探针浓度进行优化,用优化后的扩增体系进行灵敏度和特异性验证;用100例临床标本进行回顾性检测。选出具有快速扩增性能的RT-PCR Master Mix,优化后病原体上游引物、下游引物和探针终浓度分别为500nmol/L、500nmol/L和250nmol/L,内标基因上游引物、下游引物和探针终浓度均为300nmol/L、300nmol/L和150nmol/L;在此扩增体系下,9种呼吸道病毒的最低检测限均为1.0×10~3拷贝/mL,不同病毒无交叉反应,对100例临床样本检测,准确率100%。因此,本研究建立了一种可同时用于9种呼吸道病毒快速检测的微流体芯片扩增体系,采用本检测体系可在25min内实现上述9种病毒核酸定性检测。

    2020年04期 v.36 624-633页 [查看摘要][在线阅读][下载 1287K]
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人类病毒研究论著

  • 人呼吸道合胞病毒F蛋白在大肠杆菌中的表达与免疫效果研究

    李海;曹蕾;任虎;张燕;许文波;

    人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,hRSV)是婴幼儿和老年人发生严重呼吸道疾病的主要病因,自上世纪50年代hRSV被发现以来,科学家对hRSV疫苗进行了大量的实验探索,但至今没有上市的疫苗。本研究应用pET32a质粒在大肠杆菌BL21中表达并纯化了hRSV F蛋白(RBF),透射电镜下RBF以三聚体的形式存在(长约20 nm的棒状结构),与5C4抗体(识别抗原表位?)亲和常数为1.26×10~(-9)。混合铝佐剂肌肉注射免疫BALB/c小鼠,不同剂量(2.5μg、5μg和10μg)的RBF蛋白免疫效果无显著差异(P>0.05),均能诱导小鼠产生高滴度的中和抗体(滴度可达2~7),并且可以显著降低肺脏病毒滴度,减少肺脏的病理损伤(P<0.001)。与福尔马林灭活疫苗(FI-RSV)相比,RBF诱导产生偏向Th1类的细胞和体液免疫应答。RBF在动物实验中显示出良好的保护效果,同时原核表达系统具有产量和成本上的优势,因此可以作为预防人感染hRSV的潜在候选疫苗。

    2020年04期 v.36 634-642页 [查看摘要][在线阅读][下载 2984K]
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  • 水痘-带状疱疹病毒感染中性粒细胞引发自噬的作用研究

    何金蓉;齐家龙;高瑞雨;靳输梅;杨旭;马雁冰;刘存宝;

    前期研究发现,细胞自噬能为人体快速提供能量,消灭掉入侵的细菌和病毒,同时对人体抗衰老有非常重要的意义;另外中性粒细胞具有免疫防御功能,并且水痘-带状疱疹病毒能引起细胞自噬,那么探讨水痘-带状疱疹病毒感染导致中性粒细胞自噬的作用机制显得尤为重要。本研究发现水痘-带状疱疹病毒感染诱导中性粒细胞发生自噬性死亡,有助于进一步研究自噬抑制剂在抗病毒感染中的应用。其中,在人神经视网膜上皮细胞(ARPE-19)中可观察到水痘-带状疱疹病毒粒子,同时可检测到带状疱疹病毒的糖蛋白E;另外,HL-60细胞经维A酸(ATRA)刺激后诱导分化成成熟的中性粒细胞,细胞核呈分叶状,RT-PCR检测细胞的CD14/CD11b表达量升高7倍,髓过氧化物酶MPO升高1.6倍;病毒感染后细胞活力随感染剂量增加逐渐降低,Beclin-1和LC3b Ⅱ的表达与病毒的量及感染时间呈现正相关,自噬抑制剂3-ma能有效抑制由病毒感染导致的中性粒细胞自噬的发生。

    2020年04期 v.36 643-649页 [查看摘要][在线阅读][下载 2333K]
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  • hDPP4转基因及定点敲入小鼠模型的建立及其对MERS-CoV易感性比较

    熊芮;李倩倩;彭泽旭;黄维金;刘甦苏;王辰飞;柳全明;范昌发;

    中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是2012年发现的新型高致病性冠状病毒,其病死率高达34.4%。人二肽基肽酶-4(human dipeptidyl peptidase-4,hDPP4)分子是MERS-CoV进入宿主细胞的受体。为了获得稳定的MERS-CoV易感小鼠模型,本文分别利用Tol2转基因技术和CRISPR/Cas9技术将hDPP4受体导入C57BL/6小鼠,筛选获得转基因小鼠hDPP4-Tg、定点敲入小鼠hDPP4-KI;通过Q-PCR、Western Blot及活体成像技术,分析了hDPP4基因的表达特征。结果显示,在hDPP4-Tg小鼠中,其表达水平较低,在脑中高表达;而在hDPP4-KI中整体表达水平高,表达优势脏器为肺。假病毒感染实验表明,hDPP4-Tg几乎不易感,而hDPP4-KI小鼠对假病毒高度易感。进而,对假病毒感染hDPP4-KI小鼠的感染途径、感染剂量、是否剃除被毛等条件进行优化,获得了稳定易感的MERS-CoV假病毒感染模型,并利用该模型初步评价了单克隆抗体hMS-1的体内活性。本研究显示,即使相同的受体基因,不同策略构建的遗传修饰小鼠模型的效果差异较大;受体分子表达水平与模型的易感性高度相关;本研究获得的高效而稳定的MERS-CoV假病毒感染模型可望在抗体评价、疫苗研制、药物筛选等领域提供模型工具,提示将受体分子定点插入小鼠基因组、高表达受体基因是成功构建病毒易感模型首选策略。

    2020年04期 v.36 650-659页 [查看摘要][在线阅读][下载 2312K]
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  • 荧光素酶标记的重组人3型腺病毒的构建及分析

    陈诗颖;周志超;田新贵;周荣;

    人3型腺病毒在人DSG2受体转基因鼠体内复制及侵染等生命过程尚不清楚。本研究旨在构建含萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase,Fluc)报告基因的复制型重组人3型腺病毒,为可视化重组人3型腺病毒的应用奠定基础。通过PCR扩增萤火虫荧光素酶报告基因,克隆入去掉EGFP基因的人3型腺病毒穿梭质粒pSKA3E3LR(EGFP),经双酶切后与人3型腺病毒骨架质粒pBRAd3-EGFP的PCR扩增片段经重组酶Exnase体外重组的方法,得到中间载体,最后与pBRAd3-EGFP酶切片段连接,得到重组腺病毒质粒pAd3-LUC;转染AD293细胞,将包装成功的重组腺病毒rAd3-LUC纯化并免疫动物,分析重组腺病毒的特性和在小鼠体内的免疫反应。结果显示采用体外重组、酶切连接等方法成功获得到重组人3型腺病毒质粒pAd3-LUC,线性化的pAd3-LUC转染AD293细胞包装拯救得到重组腺病毒rAd3-LUC,观察到细胞病变和检测到荧光素酶的稳定表达,rAd3-LUC免疫小鼠抗血清可以识别并中和重组腺病毒rAd3-LUC(滴度约128~256)。本研究成功构建了E3区缺失并嵌入荧光素酶的复制型重组人3型腺病毒rAd3-LUC,为监控人3型腺病毒在人DSG2受体转基因小鼠体内复制及侵染等生命过程奠定基础。

    2020年04期 v.36 660-669页 [查看摘要][在线阅读][下载 4362K]
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动物病毒研究论著

  • 非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测方法的建立

    张蕾;董春娜;李静;齐鹏;肖进;危宏平;

    非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种急性、热性、高度接触性动物传染病,其病原为非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV),临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征,易感猪群病死率高达100%。为了建立一种基于合成肽技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗体血清学检测方法。本研究根据ASFV p30、p54和p72三种重要抗原设计3条合成肽,以此为包被抗原建立了ASFV间接ELISA抗体检测方法,并验证其敏感性、特异性、稳定性以及与进口试剂盒的符合率。结果显示,建立的间接ELISA方法的敏感性为91.4%,特异性为98.1%,批内和批间变异系数分别为3.7%~10.1%和4.7%~14.9%。与进口试剂盒比较,符合率为92.9%。结果表明该方法检测结果准确性高、且稳定性好,可检测ASFV特异性抗体。

    2020年04期 v.36 670-674页 [查看摘要][在线阅读][下载 924K]
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  • 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建马立克病病毒超强毒株原癌基因meq缺失株及其鉴定

    滕蔓;郑鹿平;刘金玲;柴书军;张改平;罗俊;

    近年来,CRISPR/Cas9基因编辑技术正迅速应用于大基因组DNA病毒的编辑,尤其是一些致瘤性疱疹病毒。马立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)属于甲亚科疱疹病毒,血清I型MDV(MDV-1)感染自然宿主可诱导快速发作的T细胞淋巴瘤。meq基因是MDV-1致瘤的主要原癌基因,在马立克病(Marek’s disease,MD)肿瘤发生中具有重要作用。本文以超强毒MDV(very virulent MDV,vvMDV)国际代表株Md5和我国分离株GX0101为研究对象,设计合成了多组meq基因特异性gRNA,利用CRISPR/Cas9系统成功构建了两个meq基因缺失的毒株Md5△meq-C45和GX0101△meq-C56,并对病毒基因组相关区域进行PCR扩增和测序。结果证实,meq基因被完全编辑并敲除。间接免疫荧光实验(Indirect immunofluorescence assay,IFA)显示,MEQ蛋白在两个meq基因编辑毒株感染的CEF细胞中均无表达,并且meq基因缺失经连续15次传代仍保持稳定。通过荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)对病毒增殖曲线进行测定,证实meq基因编辑不影响病毒的体外复制。本研究建立了CRISPR/Cas9系统快速编辑MDV-1病毒基因的技术方法,获得了稳定的meq基因缺失毒株,为后续MDV-1的致病及致瘤机制研究、MEQ单抗筛选鉴定及诊断试剂研发等奠定了重要基础。

    2020年04期 v.36 675-684页 [查看摘要][在线阅读][下载 2820K]
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新型冠状病毒研究专题综述

  • COVID-19疫苗的研究进展

    陈静;李波;申硕;范亚飞;

    新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的一种新的传染病。阻止COVID-19流行最有效的方法就是研制安全有效的疫苗,目前国内外多家机构开展了COVID-19疫苗的研究,包括核酸疫苗、病毒载体疫苗、灭活疫苗、重组蛋白疫苗、减毒流感病毒载体疫苗等不同类型,并取得了快速进展。本文对COVID-19疫苗的类型、研究进展、存在的问题等进行综述。

    2020年04期 v.36 685-691页 [查看摘要][在线阅读][下载 929K]
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  • 对775份毛皮动物样品检测未发现新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸阳性

    白雪;胡博;张海玲;鲁荣光;刘昊;

    目前,2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在我国各地暴发和流行,但其主要来源尚不清楚。曾有报道称该病毒来源于野生动物,如蝙蝠。而有关SARS-CoV-2在我国北方地区人工养殖的水貂、狐狸和貉等毛皮动物中的溯源性研究尚未见报道。本研究收集2016~2019年吉林、黑龙江、辽宁、河北和山东5个省份14个地区的不明原因死亡的水貂、狐狸和貉的625份组织样品,以及2019年8~12月在吉林省采集的水貂、狐和貉的150份粪便样品,通过WHO推荐的Real-time RT-PCR检测方法对上述组织及粪便样品中SARS-CoV-2进行检测。结果显示,上述775份样品中SARS-CoV-2核酸检测结果均为阴性。

    2020年04期 v.36 692-693页 [查看摘要][在线阅读][下载 856K]
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  • COVID-19的流行及研究现状

    张书晴;安树;黎孟枫;何振健;

    2019年12月,武汉市发现多例不明原因肺炎病例,随后被证实由一种新型冠状病毒引起。2020年2月11日WHO将该疾病命名为COVID-19(Coronavirus disease 2019)。此后,疫情蔓延至全国。全球多个国家和地区也出现了COVID-19。COVID-19主要经呼吸道飞沫和密切接触传播,潜伏期1~14d,多为3~7d,大部分患者症状较轻,少数患者出现呼吸困难和/或低氧血症,甚至进展为急性呼吸窘迫综合征、多器官功能衰竭等。目前尚无针对该疾病的疫苗和特异性治疗药物。本文将从病原学、流行病学、致病机制、预防与治疗等方面对COVID-19进行综述,希望对疫情防控、药物和疫苗研究提供参考。

    2020年04期 v.36 694-702页 [查看摘要][在线阅读][下载 953K]
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  • 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的致病过程及疫苗设计策略

    李珂颖;周艳琳;赵晓会;袁轶铭;郝振华;

    2019年12月中国发现了一场由新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndromes coronavirus,SARS-CoV-2)感染引发的肺炎疫情,感染者常伴有发热、干咳、呼吸困难等症状,严重情况下会出现急性呼吸窘迫综合征。SARS-CoV-2的致病过程涉及了跨物种传播,侵染宿主细胞以及与免疫系统相互抗争等多个环节,深入了解这一致病过程对于新型治疗药物的研发及病毒疫苗的设计至关重要。因此,本文对SARS-CoV-2的致病过程进行总结,并讨论了针对该病毒的疫苗设计策略。

    2020年04期 v.36 703-708页 [查看摘要][在线阅读][下载 894K]
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  • 通过SARS和MERS对COVID-19的最新认识

    戴雅蓉;黄博轩;凌荣崧;黄文杰;温婕琪;江一舟;

    自新型冠状病毒肺炎疫情暴发以来,有关新型冠状病毒的研究非常多,且借鉴对冠状病毒的现有研究,2019新型冠状病毒的感染机理也逐步认识。对于这种新型冠状病毒引起的肺炎的诊疗措施及相关药物的开发也已经开展,通过对其感染过程及受体的研究,各种抗病毒类药物再一次引起我们的兴趣。基于此前出现的SARS冠状病毒、MERS冠状病毒,以及现今的2019新型冠状病毒三种感染人的冠状病毒,本综述主要论述冠状病毒的发展进化史、传播源及传播途径、病毒的感染与复制、预防措施以及诊疗手段。

    2020年04期 v.36 709-718页 [查看摘要][在线阅读][下载 1209K]
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综述

  • 人呼吸道合胞病毒感染对机体Th1、Th2影响的研究进展

    郑海涛;任献青;闫永彬;马淑霞;陈文霞;李向峰;孙晓旭;韩姗姗;丁樱;袁斌;

    人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)感染是儿童时期罹患病毒性毛细支气管炎和肺炎的首要原因,与高发病率、住院率、死亡率明显相关。HRSV感染引起机体免疫应答失衡是导致发病的主要因素,其引发细胞介导的免疫应答方式常见的有辅助型T淋巴细胞1型(T-helper type 1,Th1)应答和辅助型T淋巴细胞2型(T-helper type 2,Th2)应答。这两种T细胞亚型的分化途径密切相关,两者之间的失衡可能在HRSV感染的发病机制中起重要作用。进一步研究和阐明HRSV感染对机体Th1、Th2之间免疫应答的作用机制将对寻找具有治疗作用的潜在靶标、通路,设计、研制安全有效的HRSV疫苗和药物具有至关重要的推动作用。

    2020年04期 v.36 719-725页 [查看摘要][在线阅读][下载 941K]
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  • 肉食兽阿留申病毒VP2和NS1蛋白功能区回顾及比较分析

    吴艳虹;韦韬;丛丽;赵永强;邵西群;

    水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)是引起水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AD)的病原体,归属肉食兽阿留申病毒基因I型,是主要研究的阿留申病毒种。AMDV结构蛋白VP2与病毒趋性、致病性和宿主范围密切相关,非结构蛋白NS1在病毒的复制、转录调控和衣壳组装过程中起重要作用。本文首先回顾了与AMDV的复制、致病性、宿主范围和抗原性相关的VP2、NS1功能位点及区段的研究进展,在此基础上,与近年来发现的其它5种肉食兽阿留申病毒对应位点、区段进行比对分析,有助于认识肉食兽阿留申病毒蛋白功能区的自然变异和预测病毒的未知功能区,为阿留申病毒的蛋白功能研究和疫苗株筛选提供新的视角。

    2020年04期 v.36 726-734页 [查看摘要][在线阅读][下载 14290K]
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  • 病毒诱导的细胞自噬与凋亡的串话关系研究进展

    孙彦鹤;周广舟;王雨润;郝超毅;鞠沛默;

    很多研究表明,病毒感染细胞后能诱导自噬和凋亡。作为两种关键的细胞命运决定途径,自噬和凋亡在病毒与宿主细胞相互作用中发挥着非常重要的作用。本文综述了目前已报告的诸如疱疹病毒、黄病毒、正粘病毒和副粘病毒等13个病毒科病毒成员感染宿主细胞后诱导的自噬和凋亡串话关系研究进展,探讨了病毒感染引发的自噬和凋亡对病毒子代复制和细胞抗病毒免疫等方面的作用,将为未来深入研究自噬和凋亡及其串话调控在病毒侵染宿主过程中的主要作用奠定坚实基础,并为开发相应的病毒防控技术提供理论依据。

    2020年04期 v.36 735-743页 [查看摘要][在线阅读][下载 919K]
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专题报道

  • 缅怀《病毒学报》首任编辑部主任陆德敏老师

    王玉梅;

    <正>陆德敏研究员一直从事科研管理与编辑出版工作,担任《病毒学报》首任编辑部主任,是我国著名的编辑出版专家,2020年5月1日因病去世。陆德敏老师生前寡言少语,对工作严谨细致,给我们留下了宝贵的精神财富,我们怀着崇敬的心情,悼念缅怀陆老师。

    2020年04期 v.36 744页 [查看摘要][在线阅读][下载 718K]
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信息

  • 《中文核心期刊要目总览》入编通知

    <正>北京大學圖書館PEKING UNIVERSITY LIBRARY《病毒学报》主编:我们谨此郑重通知:依据文献计量学的原理和方法,经研究人员对相关文献的检索、统计和分析,以及学科专家评审,贵刊《病毒学报》入编《中文核心期刊要目总览》2017年版(即第8版之"基础医学"类的核心期刊。该书由北京大学出版社出版。书中按《中国图书馆分类法》的)学科体系,列出了78个学科的核心期刊表,并逐一对核心期刊进行了著录。著录项目包括:题名、并列题名、主办单位、创刊时间、出版周期、学科分类号、ISSN号、CN号、邮发代号、编辑部地址、邮政编码、电话、网址、电子邮箱、内容简介等。

    2020年04期 v.36 745页 [查看摘要][在线阅读][下载 1169K]
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  • 中国科技核心期刊(中国科技论文统计源期刊)收录证书

    <正>病毒学报经过多项学术指标综合评定及同行专家评议推荐,贵刊被收录为"中国科技核心期刊"(中国科技论文统计源期刊)。特颁发此证书。

    2020年04期 v.36 746页 [查看摘要][在线阅读][下载 1019K]
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  • 证书

    <正>《病毒学报》编辑部:在第五届《中国学术期刊评价研究报告(武大版)(2017-2018)》中,贵刊被评为"RCCSE中国核心学术期刊(A)"。特发此证。

    2020年04期 v.36 747页 [查看摘要][在线阅读][下载 10629K]
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  • 中国科学引文数据库(CSCD)来源期刊收录证书

    <正>病毒学报依据文献计量学的理论和方法,通过定量与定性相结合的综合评审,贵刊被收录为中国科学引文数据库(CSCD)来源期刊,特颁发此证书。证书编号:CSCD2019-0249有效期:2019年-2020年发证日期:2019年5月查询网址:www.sciencechina.cn

    2020年04期 v.36 748页 [查看摘要][在线阅读][下载 344K]
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  • 中国学术期刊影响因子年报统计刊源证书

    <正>《病毒学报》编辑部经过多项学术指标、综合评定,贵刊入选2019 《中国学术期刊影响因子年报》统计源期刊。特颁发此证书证书编号:LY 2019-BDXB证书有效期:2020年9月

    2020年04期 v.36 749页 [查看摘要][在线阅读][下载 810K]
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  • 中国学术期刊影响因子年报(自然科学与工程技术·2019版)

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    2020年04期 v.36 750页 [查看摘要][在线阅读][下载 696K]
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  • 2020年中国微生物学会及各专业委员会学术活动计划表

    <正>~~

    2020年04期 v.36 751-752页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K]
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  • 《病毒学报》征稿简则

    <正>(2018年12月25日修订)《病毒学报》是病毒学专业学术刊物,创刊于1985年,国际标准刊号:ISSN1000-8721,国内统一刊号:CN 11-1865/R,国内邮发代号:82-227,国外发行代号:BM6448。主管单位是中国科学技术协会,主办单位是中国微生物学会,承办单位是中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。《病毒学报》是中国精品科技期刊;中国科技核心期刊;北京大学基础医学核心期刊(中文期刊要目总览);武汉大学RCCSE(中国科学评价研究中心)中国核心学术期刊。刊载人与动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、噬菌体、类病毒、朊病毒以及新病毒等的基础理论研究和应用研究的新成果、新进展。栏目有论著、研究快报、评述、综述、简讯等。

    2020年04期 v.36 753页 [查看摘要][在线阅读][下载 254K]
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  • 《病毒学报》第六届编辑委员会成员名单

    <正>~~

    2020年04期 v.36 754页 [查看摘要][在线阅读][下载 2927K]
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